| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一部分：引言 | 第13-17页 |
| 第二部分：材料与方法 | 第17-27页 |
| 1 材料 | 第17-22页 |
| ·菌种 | 第17页 |
| ·质粒 | 第17-18页 |
| ·培养基及培养条件 | 第18页 |
| ·缓冲液、展层剂、显色剂 | 第18-20页 |
| ·工具酶 | 第20页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-27页 |
| ·糖多孢红霉菌总DNA的小量提取制备 | 第22页 |
| ·糖多孢红霉菌总DNA的大量制备 | 第22页 |
| ·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第23页 |
| ·糖多孢红霉菌孢子的制备 | 第23页 |
| ·糖多孢红霉菌原生质体的制备和转化 | 第23-25页 |
| ·DNA扩增PCR2.8 DNA限制性酶切 | 第25页 |
| ·DNA片段的连 | 第25页 |
| ·DNA电泳分离 | 第25页 |
| ·DNA片段的回收和纯化 | 第25-26页 |
| ·发酵产物的提取 | 第26页 |
| ·发酵产物HPLC初步分离 | 第26页 |
| ·生物活性检测 | 第26页 |
| ·发酵产物的质谱分析 | 第26-27页 |
| 第三部分：结果和讨论 | 第27-44页 |
| 1 pUC18-YA质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·PCR引物的设计 | 第27页 |
| ·pUC18-YA质粒的构建 | 第27-28页 |
| ·pUC18-YA的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·pUC18-YA质粒的双酶切鉴定 | 第29页 |
| ·pUC18-YA质粒的测序分析 | 第29页 |
| 2 pWHM3-YA质粒的构建和鉴定 | 第29-31页 |
| ·pWHM3-YA质粒的构建 | 第29页 |
| ·pWHM3-YA的PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·pWHM3-YA质粒的双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 3 整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B的筛选和鉴定 | 第31-32页 |
| ·整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B的筛选 | 第31页 |
| ·整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B的鉴定 | 第31-32页 |
| 4 整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B质粒整合位点的确 | 第32-36页 |
| ·整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B培养液的枯草杆菌抑制实验 | 第32-35页 |
| ·整合体A226-pWHM3-YA-A和A226-pWHM3-YA-B发酵产物的薄层色谱分析 | 第35-36页 |
| 5 糖多孢红霉菌突变体A226-YA-A和A226-YA-B的筛选和序列 | 第36-39页 |
| ·糖多孢红霉菌突变体A226-YA-A和A226-YA-B的筛选 | 第36-38页 |
| ·糖多孢红霉菌突变体A226-YA-A的序列鉴定 | 第38-39页 |
| 6 糖多孢红霉菌突变体A226-YA发酵产物的分析鉴定 | 第39-41页 |
| ·糖多孢红霉菌突变体A226-YA发酵产物的薄层色谱分析 | 第39-40页 |
| ·糖多孢红霉菌突变体A226-YA发酵产物的质谱分析 | 第40-41页 |
| 7 讨论 | 第41-44页 |
| ·KR6酶域DNA序列的定点突变体A226-YA与λC3-SRR突变体的比 | 第41页 |
| ·突变体A226-YA合成的DOEB产量低的分析 | 第41-44页 |
| 第四部分：总结 | 第44-46页 |
| 1 本研究主要获得的结果 | 第44页 |
| 2 本论文的创新之处 | 第44页 |
| 3 需进一步研究的问题 | 第44-46页 |
| 论文参考文献 | 第46-49页 |
| 附录(序列分析图谱) | 第49-52页 |
| 综述 | 第52-65页 |
| 综述的参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
