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狂犬病新型口服疫苗—糖蛋白表达质粒的构建以及表达细菌的筛选

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
前言第8-28页
第一章 材料与方法第28-40页
   ·材料第28-31页
     ·病毒第28页
     ·质粒和菌种第28页
     ·工具酶、试剂盒及生化药品第28页
     ·引物第28页
     ·质粒提取试剂配制第28-29页
     ·制备感受态细胞用的试剂第29-30页
     ·培养基配制第30页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第30-31页
     ·仪器第31页
   ·方法第31-40页
     ·PET-G表达载体的构建第31-35页
       ·ERA株的处理第31-32页
       ·RT-PCR总病毒RNA提取第32页
       ·RT-PCR扩增G基因第32-33页
       ·回目的片段第33页
       ·G基因与T载体连接第33-34页
       ·转化第34页
       ·筛选与培养第34页
       ·抽提质粒第34页
       ·酶切鉴定质粒PMDT-G第34-35页
       ·酶切原核表达载体PET-32a第35页
       ·连接G基因与PET-32a第35页
       ·酶切鉴定质粒PET-G第35页
     ·口腔细菌的分离与鉴定第35-36页
       ·采集口腔细菌第35-36页
       ·纯化口腔细菌第36页
       ·保存细菌第36页
       ·口腔细菌的鉴定第36页
     ·口腔细菌的转化第36-40页
       ·化学转化法感受态细胞的制备第36-37页
       ·电转化法感受态细胞的制备第37页
         ·革兰氏阴性细菌的转化第37-38页
       ·革兰氏阳性细菌的转化第38页
       ·筛选与培养第38页
       ·抽提质粒鉴定第38-40页
第二章 实验结果第40-49页
   ·RT-PCR扩增狂犬病病毒ERA株的G基因结果第40页
   ·G基因克隆到PMD-T载体以及酶切鉴定结果第40-41页
     ·G基因亚克隆到PET-32a表达载体以及酶切鉴定结果第41页
     ·口腔细菌的分离和鉴定结果第41-49页
第三章 讨论第49-51页
   ·程研究背景与目的、意义的关系第49页
   ·口腔细菌分离存在的主要问题以及解决办法第49页
   ·感受态细胞研究过程中出现的问题以及解决办法第49页
   ·转化出现的问题以及解决方法第49-50页
   ·下一步要的工作方向第50-51页
第四章 小结第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60页

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