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喜树生态系内生真菌的分子鉴定及药物化学研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-14页
第一章 前言第14-25页
 1. 植物内生真菌及其活性代谢产物的研究进展第14-19页
   ·内生真菌及其代谢产物的生物多样性第14-16页
   ·内生真菌的活性代谢产物的开发利用第16-19页
 2. 喜树及其代谢产物简介第19-21页
   ·喜树简介第19页
   ·喜树次生代谢产物研究简介第19-21页
     ·喜树碱第20页
     ·喜树碱的衍生物及其应用第20-21页
 3. 分子生物学技术在内生真菌研究中的应用第21-23页
   ·现阶段内生真菌研究的一般方法第21页
   ·分子生物学技术的引入第21-23页
   ·应用分子生物学技术在内生真菌研究中发现的新问题第23页
 4. 本研究的内容第23页
 5. 本研究的目的和意义第23-25页
第二章 喜树生态系内生真菌的分离及初步研究第25-38页
 1. 材料与方法第25-29页
   ·植物材料第25页
   ·仪器和试剂第25-26页
   ·分离培养基的配制及灭菌第26-27页
   ·内生真菌分离纯化方法第27-28页
     ·样品的表面消毒及预处理第27-28页
     ·内生真菌的分离与纯化第28页
   ·内生真菌的形态学鉴定方法第28-29页
   ·保存方法第29页
 2. 结果与分析第29-35页
   ·消毒剂及消毒时间的确定第29-31页
   ·喜树内生真菌的分离结果第31页
   ·喜树生长朝向对于内生真菌数目的影响第31-32页
   ·形态学鉴定结果第32-35页
 3. 小结与讨论第35-38页
第三章 应用分子生物学技术对喜树内生真菌的鉴定第38-56页
 1. 材料与方法第38-43页
   ·实验材料第38页
   ·仪器和试剂第38-39页
   ·基因组 DNA的提取及纯化第39-41页
     ·试剂配制第39-40页
     ·基因组 DNA的提取第40-41页
   ·DNA纯度的检测第41-42页
     ·紫外光吸收检测第41页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第41-42页
   ·多聚酶链式反应(PCR扩增)第42-43页
     ·本实验所用引物第42页
     ·扩增条件第42页
     ·扩增产物检测第42-43页
   ·扩增产物的纯化及序列的测定第43页
   ·内生真菌的分子鉴定及系统发生关系分析第43页
 2. 结果与分析第43-54页
   ·DNA提取第43-44页
   ·ITS区段的PCR扩增第44页
   ·PCR扩增产物的序列测定第44页
   ·在GenBank上的搜索(Blast)结果第44-47页
   ·基于ITS区段序列的内生真菌鉴定第47-54页
     ·通过rDNA ITS序列分析所揭示的喜树内生真菌多样性第47-51页
     ·喜树内生拟茎点霉的分子生物学鉴定及系统发生关系分析第51-54页
 3. 小结与讨论第54-56页
第四章 喜树内生真菌的药物化学研究第56-63页
 1. 材料与方法第56-58页
   ·仪器、药材和试剂第56-57页
   ·方法第57-58页
     ·标准溶液的配制第57页
     ·实验材料的培养及预处理第57页
     ·供试品溶液的准备第57页
     ·TCL方法检测 CPT第57-58页
     ·色谱条件第58页
 2. 结果与分析第58-62页
   ·TLC方法筛选结果第58-59页
   ·标准品及样品的HPLC检测图谱与分析第59-62页
 3. 小结与讨论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-69页
附录第69-83页
原创性声明第83页
关于学位论文使用授权的声明第83页

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