根霉纤溶酶液态发酵、分离纯化和酶学性质研究
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·血栓栓塞性疾病、凝血与纤溶 | 第11-13页 |
| ·血栓栓塞性疾病 | 第11页 |
| ·凝血 | 第11-12页 |
| ·纤溶 | 第12-13页 |
| ·纤溶酶类溶栓剂应用状况 | 第13-14页 |
| ·纤溶酶类溶栓剂研究开发状况 | 第14-19页 |
| ·重组t-PA的突变体、嵌合体、单抗导向溶栓剂 | 第14-15页 |
| ·微生物来源的溶栓剂 | 第15-17页 |
| ·其它生物来源的纤溶酶 | 第17-19页 |
| ·本课题的立题背景和研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·主要原料与材料 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20-21页 |
| ·主要设备与仪器 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要溶液 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-26页 |
| ·斜面培养方法 | 第22页 |
| ·种子培养方法 | 第22页 |
| ·摇瓶液体发酵培养方法 | 第22页 |
| ·纤溶酶活力的测定方法 | 第22-23页 |
| ·pH的测定方法 | 第23页 |
| ·酶的盐析方法 | 第23页 |
| ·疏水相互作用层析方法 | 第23页 |
| ·离子交换层析方法 | 第23页 |
| ·凝胶层析方法 | 第23页 |
| ·高分离度疏水色谱检验酶纯度方法 | 第23页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第23-24页 |
| ·凝胶层析法测定纤溶酶分子量 | 第24页 |
| ·纤溶酶等电点的测定 | 第24页 |
| ·纤溶酶最适作用温度的确定 | 第24页 |
| ·纤溶酶热稳定性的确定 | 第24-25页 |
| ·纤溶酶最适作用pH的确定 | 第25页 |
| ·纤溶酶pH稳定性的确定 | 第25页 |
| ·蛋白酶抑制剂对酶的作用 | 第25-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-45页 |
| ·培养基和培养条件的优化 | 第26-30页 |
| ·碳源的选择 | 第26页 |
| ·纤溶酶的诱导和氮源的选择 | 第26-27页 |
| ·适宜碳氮比的确定 | 第27-28页 |
| ·培养基初始pH的确定 | 第28页 |
| ·接种量和发酵时间的确定 | 第28-30页 |
| ·优化条件下的摇瓶液体发酵实验 | 第30页 |
| ·小结 | 第30页 |
| ·根霉液态发酵产生纤溶酶的分离纯化 | 第30-39页 |
| ·本实验的基本思路 | 第30-31页 |
| ·酶分离纯化用的缓冲液的选择 | 第31页 |
| ·酶的盐析 | 第31-32页 |
| ·酶的疏水作用层析 | 第32-35页 |
| ·酶的离子交换层析 | 第35-36页 |
| ·酶的凝胶层析 | 第36-37页 |
| ·酶纯度的检验 | 第37-38页 |
| ·酶的纯化回收情况 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| ·根霉液体发酵产生纤溶酶的酶学性质 | 第39-45页 |
| ·酶分子量的测定 | 第39-40页 |
| ·酶等电点的测定 | 第40-41页 |
| ·酶的最适作用温度和热稳定性 | 第41-42页 |
| ·酶的最适作用pH和pH稳定性 | 第42-43页 |
| ·蛋白酶抑制剂对酶的作用 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
