| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-53页 |
| 一、血管生成因子与肿瘤的关系 | 第8-37页 |
| (一) 血管生成简介 | 第8页 |
| (二) 血管生成与肿瘤 | 第8-9页 |
| (三) 抗血管生成的肿瘤治疗 | 第9-11页 |
| (四) 血管生成因子简介 | 第11-30页 |
| (五) 血管生成因子对肿瘤的生长、转移及预后的意义 | 第30-37页 |
| 二、血管生成素的结构功能及与肿瘤的关系 | 第37-45页 |
| (一) 血管生成素的结构与性质 | 第37-38页 |
| (二) 血管生成素的生物学功能 | 第38页 |
| (三) 血管生成素的作用机制 | 第38-41页 |
| (四) 血管生成素与肿瘤 | 第41-42页 |
| (五) 血管生成素的抑制剂 | 第42-45页 |
| 三、bFGF的结构功能及与肿瘤的关系 | 第45-49页 |
| (一) bFGF的结构与性质 | 第45-46页 |
| (二) bFGF的作用机制 | 第46-48页 |
| (三) bFGF的生物学作用 | 第48页 |
| (四) bFGF与肿瘤 | 第48-49页 |
| 四、黑色素瘤的研究进展 | 第49-53页 |
| (一) 黑色素瘤简介 | 第49页 |
| (二) 黑色素瘤与血管生成因子 | 第49-51页 |
| (三) 血管生成素在黑色素瘤中的表达及其作用 | 第51页 |
| (四) bFGF在黑色素瘤中的表达及其作用 | 第51页 |
| (五) 抗血管生成因子的黑色素瘤治疗 | 第51-53页 |
| 第二章 引言 | 第53-56页 |
| 一、研究背景和立题依据 | 第53-55页 |
| 二、本文的研究内容和意义 | 第55-56页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第56-70页 |
| 一、实验材料 | 第56-57页 |
| (一) 细胞和质粒 | 第56页 |
| (二) 主要试剂 | 第56页 |
| (三) 主要仪器 | 第56-57页 |
| 二、实验方法 | 第57-70页 |
| (一) 大量制备质粒的方法 | 第57-58页 |
| (二) 哺乳动物细胞培养 | 第58-59页 |
| (三) 哺乳动物细胞转染 | 第59页 |
| (四) 哺乳动物细胞基因组的提取 | 第59-60页 |
| (五) 哺乳动物细胞总RNA的提取 | 第60-62页 |
| (六) 逆转录PCR (RT-PCR) | 第62-63页 |
| (七) 酶联免疫吸附实验 | 第63-64页 |
| (八) SDS-PAGE 电泳及Western Blotting | 第64-67页 |
| (九) 免疫荧光 | 第67页 |
| (十) 免疫胶体金透射电镜 | 第67-69页 |
| (十一) MTT法 | 第69-70页 |
| 第四章 实验结果与分析 | 第70-90页 |
| 一、稳定转染血管生成素基因的细胞株的获得 | 第70-74页 |
| (一) 质粒的制备及电穿孔转染与筛选 | 第70-73页 |
| (二) 阳性细胞克隆的鉴定 | 第73-74页 |
| 二、外源血管生成素基因的转入对细胞内源血管生成素表达的影响 | 第74-78页 |
| (一) 外源血管生成素基因的转入对细胞内源血管生成素m RNA 表达的影响 | 第74-76页 |
| (二) 外源血管生成素基因的转入对细胞内源血管生成素蛋白表达的影响 | 第76-78页 |
| 三、血管生成素对A375 细胞生长的影响 | 第78-80页 |
| (一) MTT 法实验条件的确定 | 第78-79页 |
| (二) 血管生成素对细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
| 四、血管生成素在A375 细胞中进行核转移作用 | 第80-83页 |
| (一) 血管生成素核转移作用的免疫荧光分析 | 第80-81页 |
| (二) 免疫电镜分析血管生成素在细胞核中的定位 | 第81-83页 |
| 五、新霉素对A375 细胞的增殖具有抑制作用 | 第83-85页 |
| (一) 新霉素抑制血管生成素在A375 细胞中的核转移作用 | 第83-84页 |
| (二) 新霉素抑制A375 细胞的增殖 | 第84-85页 |
| 六、血管生成素对bFGF 表达的影响 | 第85-88页 |
| (一) 外源血管生成素基因的转入对细胞bFGF mRNA 表达的影响 | 第85-87页 |
| (二) 外源血管生成素基因的转入对细胞bFGF 蛋白表达的影响 | 第87-88页 |
| 七、血管生成素对bFGF 诱发的细胞增殖的作用 | 第88-90页 |
| 第五章 讨论 | 第90-98页 |
| 一、外源血管生成素基因的转入影响细胞内源血管生成素的表达 | 第90-92页 |
| (一) 稳定转染细胞系的建立 | 第90-91页 |
| (二) 外源血管生成素基因的转入影响细胞内源血管生成素的表达 | 第91-92页 |
| 二、血管生成素对A375 细胞的增殖具有促进作用 | 第92-93页 |
| 三、血管生成素通过核转移作用促进A375 细胞的增殖 | 第93-95页 |
| (一) 血管生成素在A375 细胞中进行核转移作用 | 第93-94页 |
| (二) 新霉素抑制血管生成素在A375 细胞中的核转移作用 | 第94页 |
| (三) 新霉素对A375 细胞的增殖具有抑制作用 | 第94-95页 |
| 四、血管生成素对bFGF 表达具有负调节的作用 | 第95-96页 |
| 五、血管生成素对bFGF 诱发的细胞增殖具有促进作用 | 第96-98页 |
| 结论与创新点 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-120页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第120-121页 |
| 在读期间参加科研项目情况 | 第121页 |
