| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-13页 |
| 专业名词缩写中英文对照表 | 第13-15页 |
| 实验技术路线图 | 第15-17页 |
| 第一章 综述 | 第17-36页 |
| ·胚胎干细胞及信号调控 | 第18-24页 |
| ·胚胎干细胞 | 第18页 |
| ·胚胎干细胞自我更新相关的主要信号通路 | 第18-23页 |
| ·胚胎干细胞自我更新过程中其他重要信号分子 | 第23-24页 |
| ·Wnt基因的功能研究进展 | 第24-30页 |
| ·RNA干扰研究 | 第30-32页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂与精子发生 | 第32-36页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | 第32-34页 |
| ·精子发生 | 第34-36页 |
| 第二章 材料和方法 | 第36-70页 |
| ·实验材料 | 第36-46页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·细胞系 | 第36-37页 |
| ·细菌和质粒 | 第37-40页 |
| ·主要试剂及材料 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| ·引物 | 第42-46页 |
| ·主要抗体 | 第46页 |
| ·研究方法 | 第46-70页 |
| ·生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第46-47页 |
| ·数据库消减杂交 | 第47-52页 |
| ·多组织RT-PCR验证差异表达的结果 | 第52页 |
| ·GenBank数据库检索和序列的计算机分析 | 第52-53页 |
| ·阅读框架的实验验证 | 第53-54页 |
| ·质粒DNA的提取和小量胶回收DNA | 第54-56页 |
| ·RNA的抽提 | 第56-57页 |
| ·PCR反应 | 第57-58页 |
| ·半定量RT-PCR | 第58-59页 |
| ·Northern杂交 | 第59-60页 |
| ·组织原位杂交 | 第60-62页 |
| ·Cymg1和Wnt9a基因多克隆抗体的制备 | 第62页 |
| ·免疫组化 | 第62-63页 |
| ·pQE-30／Cymg1基因融合蛋白的原核表达 | 第63-64页 |
| ·Lipofectamine2000介导的基因瞬时转染 | 第64-65页 |
| ·CYMG1蛋白的亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·WNT9A蛋白的亚细胞定位 | 第66页 |
| ·构建表达siWnt9as的pAVU6+27质粒 | 第66-67页 |
| ·pAVU6+27／siWnt9as质粒瞬时转染MCF-7乳腺癌细胞 | 第67-68页 |
| ·WNT9A蛋白的亚细胞定位及转染效率估算 | 第68页 |
| ·瞬时转染RNA干扰效果的检测 | 第68页 |
| ·流式细胞仪技术 | 第68-69页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期 | 第69页 |
| ·hESCs的核型检测 | 第69-70页 |
| 第三章 研究结果 | 第70-171页 |
| ·Wnt基因在hES体外培养过程中的差异表达 | 第70-87页 |
| ·hES细胞核型检测 | 第70-71页 |
| ·Wnt在hES细胞体外培养过程中的差异表达 | 第71-85页 |
| ·Wnt在癌细胞株和不同核型hESCs中表达 | 第85-87页 |
| ·Human Wnt9a的RNA干扰研究 | 第87-126页 |
| ·Human Wnt9a的生物信息学分析 | 第87-102页 |
| ·Human Wnt9a功能的初步研究 | 第102-111页 |
| ·Wnt9a的RNA干扰研究 | 第111-126页 |
| ·Cymg1和Rcet1新基因的克隆和功能的初步研究 | 第126-171页 |
| ·小鼠生精相关新基因Cymg1和Rcet1的克隆 | 第126-129页 |
| ·新基因Cymg1和Rcet1的数字化表达图谱 | 第129-134页 |
| ·新基因Cymg1和Rcet1的染色体定位及剪切位点分析 | 第134-139页 |
| ·新基因Cymg1的酶切位点分析 | 第139-140页 |
| ·新基因Cymg1和Rcet1的蛋白结构域、同源性及保守位点分析 | 第140-145页 |
| ·CYMG1和RCET1蛋白质序列的计算机分析 | 第145-160页 |
| ·多组织RT-PCR检测Cymg1和Rcet1基因的组织表达谱 | 第160-164页 |
| ·Northern杂交法检测新基因Cymg1在小鼠多组织中的特异性表达 | 第164页 |
| ·Rcet1(Rcet1_v1,Rcet1_v2)基因在小鼠睾丸组织中的原位杂交 | 第164-165页 |
| ·Cymg1基因在活细胞中的定位 | 第165-167页 |
| ·pQE-30／CYMG1融合蛋白的原核表达 | 第167-169页 |
| ·免疫组化 | 第169-171页 |
| 第四章 讨论 | 第171-183页 |
| ·Wnt基因在hESCs体外培养过程中在feeder cells和hESCs中的差异表达 | 第171-174页 |
| ·Human Wnt9a的RNAi研究 | 第174-177页 |
| ·CYMG1和RCET1新基因的克隆和功能的初步研究 | 第177-183页 |
| ·数据库消减杂交在睾丸特异性表达的新基因克隆中的应用 | 第177-179页 |
| ·新基因Cymg1和Rcet1的表达特征 | 第179-183页 |
| 结论 | 第183-184页 |
| 参考文献 | 第184-199页 |
| 致谢 | 第199-200页 |
| 读博士期间发表论文目录 | 第200-201页 |
| 个人简历 | 第201页 |
