| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 第一部分 文献综述 | 第7-19页 |
| 第二部分 材料方法 | 第19-40页 |
| 1.材料 | 第19页 |
| ·毒株来源 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-27页 |
| ·Rv病毒的增殖 | 第19-20页 |
| ·感染RV鼠脑细胞总RNA的提取 | 第20页 |
| ·电泳检测提取的细胞总RNA | 第20-21页 |
| ·RT-PCR、3’-Full RACE扩增 | 第21-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第21页 |
| ·反转录合成三段基因CDNA第一链 | 第21-22页 |
| ·PCR | 第22-23页 |
| ·琼脂糖凝胶鉴定扩增产物 | 第23页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第23-25页 |
| ·大肠杆菌(JM109)感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·PCR目的片断的回收 | 第23-24页 |
| ·外源DNA片段与T载体的连接反应 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·质粒小量制备 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第26页 |
| ·将含有重组质粒的重组菌穿刺培养，送生物公司测序 | 第26-27页 |
| ·序列分析与比较 | 第27页 |
| 3.实验结果 | 第27-34页 |
| ·感染RV乳鼠临床症状的观察 | 第27页 |
| ·感染鼠脑细胞总RNA的提取结果 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第28页 |
| ·3’-Full RACE扩增结果 | 第28-29页 |
| ·PCR产物阳性克隆和鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·序列分析结果 | 第30-34页 |
| ·PCR扩增产物序列结果 | 第30页 |
| ·L基因C末端基因核苷酸及推导氨基酸序列比较结果 | 第30页 |
| ·狂犬病病毒属内各毒株L基因C末端基因核苷酸及推导氨基酸同源性比较结果 | 第30-31页 |
| ·狂犬病病毒属内各毒株L基因C末端基因的系统进化树 | 第31-32页 |
| ·L基因5’端非编码区(NCS)核酸序列比较分析 | 第32-34页 |
| 4.讨论 | 第34-40页 |
| ·关于毒株毒力 | 第34页 |
| ·关于防止RNA的降解 | 第34-35页 |
| ·反转录过程中出现的问题及解决办法 | 第35-36页 |
| ·关于RT—PCR和3’—Full RACE反应中常见的问题及解决方法 | 第36-39页 |
| ·3’-Full RACE法 | 第36页 |
| ·PCR产物的电泳检测时间 | 第36-37页 |
| ·假阴性,不出现扩增条带 | 第37-38页 |
| ·假阳性 | 第38页 |
| ·出现非特异性扩增带 | 第38页 |
| ·出现片状拖带或涂抹带 | 第38-39页 |
| ·PCR产物回收 | 第39页 |
| ·外源片断的连接与转化 | 第39页 |
| ·计算机分析L基因C端序列及狂犬病毒基因组5’末端基因序列 | 第39-40页 |
| 第三部分 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录Ⅰ | 第46-51页 |
| 附录Ⅱ | 第51-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简历 | 第85页 |
