| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-26页 |
| 1、研究背景及意义 | 第9-10页 |
| 2、MAPK 信号通路 | 第10-12页 |
| 3、Ⅲ型分泌系统（Type III Secretion system） | 第12-13页 |
| 4、OspF 家族（包括SpvC）磷酸苏氨酸裂合酶的催化机制 | 第13-16页 |
| 5、酶的抑制作用 | 第16-17页 |
| 6、pET-SUMO 及pGEx-6 蛋白表达系统 | 第17-20页 |
| 7、反相-HPLC 简介 | 第20-21页 |
| 8、基因的定点诱变 | 第21-23页 |
| 9、蛋白的纯化 | 第23-26页 |
| 第一章 目的基因的克隆、蛋白的表达及纯化 | 第26-48页 |
| ·引言与实验设计 | 第26页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验设计 | 第26页 |
| ·实验原理 | 第26-27页 |
| ·基因的克隆 | 第27-39页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·基因克隆所需仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-39页 |
| ·蛋白的大量表达及纯化（4℃层析柜） | 第39-43页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·蛋白纯化所需仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·基因克隆的结果 | 第43-45页 |
| ·蛋白表达及纯化结果 | 第45-47页 |
| ·本章结论 | 第47-48页 |
| 第二章 抑制剂的制备与纯化 | 第48-55页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验所需仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·抑制剂的设计 | 第49-50页 |
| ·磷酸化多肽的β-消去反应 | 第50页 |
| ·RP-HPLC(反相HPLC) | 第50-51页 |
| ·碳碳双键的鉴定 | 第51页 |
| ·实验结果与分析 | 第51-54页 |
| ·本章结论 | 第54-55页 |
| 第三章 抑制剂对SpvC、OspF 活性的抑制 | 第55-70页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验所需仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-63页 |
| ·测活酶量的确定 | 第56-58页 |
| ·酶的自然失活情况 | 第58-59页 |
| ·抑制剂对酶活性的抑制 | 第59-62页 |
| ·蛋白印迹 western-blot | 第62-63页 |
| ·实验结果与分析 | 第63-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 发表论文、参加科研情况的说明 | 第77-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
