摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 文献综述 | 第18-43页 |
一、单倍体技术在水稻上的研究及展望 | 第18-25页 |
1 单倍体的获得途径 | 第18-20页 |
·自然发生的单倍体 | 第18-19页 |
·从双胚苗中选择单倍体 | 第19页 |
·种间或属间远缘杂交 | 第19页 |
·组织和细胞离体培养 | 第19-20页 |
·核质互作 | 第20页 |
·利用单倍体启动基因 | 第20页 |
2 单倍体产生的可能机制及其遗传规律 | 第20-21页 |
·阻碍受精因素 | 第20页 |
·胚乳的作用 | 第20-21页 |
·单倍体的遗传基础 | 第21页 |
3 单倍体结实与它的减数分裂 | 第21-22页 |
4 单倍体与二倍体的比较研究 | 第22页 |
5 单倍体的遗传优势 | 第22-23页 |
6 单倍体技术在水稻遗传育种中的应用 | 第23-25页 |
·单倍体技术在水稻育种中的应用 | 第23-24页 |
·单倍体技术在水稻物种进化研究上的应用 | 第24页 |
·单倍体技术在水稻遗传学研究上的应用 | 第24页 |
·单倍体技术在水稻分子生物学上的应用 | 第24-25页 |
二、DNA甲基化及其生物学功能 | 第25-31页 |
1 DNA甲基转移酶 | 第25-26页 |
2 DNA甲基化的机制 | 第26-27页 |
3 MBD蛋白与DNA甲基化的识别 | 第27-29页 |
4 DNA甲基化检测方法 | 第29页 |
5 DNA甲基化的生物学功能 | 第29-31页 |
·DNA甲基化是植物正常生长发育所必需 | 第30页 |
·DNA甲基化与转基因植物的基因沉默有关 | 第30页 |
·DNA甲基化在基因组防御中起作用 | 第30页 |
·DNA甲基化还可以使植物花粉处于休眠期 | 第30页 |
·DNA甲基化对于植物的生长发育和组织分化具有十分重要的调控作用 | 第30页 |
·低温可能通过降低DNA甲基化水平而诱导植物开花 | 第30-31页 |
6 展望 | 第31页 |
三、基因芯片的研究进展 | 第31-38页 |
1 基因芯片的概念和发展概况 | 第31-32页 |
2 基因芯片的制备和基本操作 | 第32-33页 |
·基因芯片的制备 | 第32页 |
·基因芯片的基本操作 | 第32-33页 |
3 基因芯片在农业研究中的应用 | 第33-38页 |
·植物发育生物学及植物抗逆性基因表达调控研究 | 第33-34页 |
·作物品种资源研究与品种改良 | 第34-35页 |
·转基因植物表达调控研究及转基因作物和农产品的检测 | 第35页 |
·农业微生物研究 | 第35-36页 |
·畜牧业品种改良及畜禽流行病研究 | 第36页 |
·基因芯片在植物育种上的应用 | 第36-38页 |
四、其它分子技术的研究进展 | 第38-41页 |
1 AFLP技术 | 第38-39页 |
2 RT-PCR技术 | 第39-41页 |
3 微卫星等标记 | 第41页 |
五、立题依据 | 第41-43页 |
第二部分 材料与方法 | 第43-67页 |
1 材料、药品和仪器 | 第43-45页 |
·水稻材料 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-45页 |
·主要仪器设备 | 第45页 |
2 试验方法 | 第45-67页 |
·材料的田间处理 | 第46-47页 |
·DNA和RNA的提取、纯化和定量 | 第47-50页 |
·SSR分析 | 第50-51页 |
·MSAP分析 | 第51-56页 |
·cDNA-AFLP实验程序 | 第56-61页 |
·数据处理 | 第61-62页 |
·芯片数据处理流程 | 第62-66页 |
·RT-PCR分析 | 第66-67页 |
第三部分 结果与分析 | 第67-104页 |
1 倍性鉴定 | 第67页 |
2 外观及农艺性状调查 | 第67-68页 |
·外观 | 第67-68页 |
·其它农艺性状统计分析 | 第68页 |
3 减数分裂异常行为及花粉育性 | 第68-70页 |
·花粉母细胞减数分裂观察 | 第69页 |
·花粉育性鉴定 | 第69-70页 |
4 微卫星分析 | 第70页 |
5 甲基化水平差异分析 | 第70-76页 |
·MSAP分析 | 第70-71页 |
·单倍体与相应的二倍体甲基化水平 | 第71-72页 |
·单倍体与相应的二倍体的不同甲基化类型 | 第72-75页 |
·甲基化变异遍布于整个基因组且具有位点特异性 | 第75-76页 |
6 单倍体水稻基因芯片扫描数据的结果分析 | 第76-89页 |
·芯片杂交与质量控制 | 第76页 |
·SARII-628来源的单倍体与二倍体芯片扫描结果 | 第76-77页 |
·芯片数据列表 | 第77-78页 |
·SARII-628来源的单倍体与二倍体的基因表达变化及其比例 | 第78-79页 |
·单倍化敏感序列的表达量的变化差异比较 | 第79-80页 |
·单倍化敏感序列在染色体上的分布 | 第80-82页 |
·单倍化敏感序列的功能分类 | 第82-87页 |
·单倍化敏感序列与9311基因的功能分类比较 | 第87-89页 |
7 RT-PCR | 第89-95页 |
·ss-cDNA的准备 | 第89页 |
·目标序列的选定 | 第89-90页 |
·单倍体和对应二倍体的RT-PCR结果 | 第90-91页 |
·单倍体激活序列的RT-PCR结果 | 第91-92页 |
·单倍体沉默序列的RT-PCR结果 | 第92-94页 |
·总体变化位点在单倍体各个器官中的比较 | 第94-95页 |
8 cDNA-AFLP技术分析 | 第95-102页 |
·材料的准备及操作 | 第95页 |
·单倍体与对应二倍体的cDNA-AFLP水平变化 | 第95-96页 |
·单倍体与对应的二倍体的不同表达变化类型 | 第96-98页 |
·单倍体与二倍体在不同器官上的差异 | 第98-99页 |
·单倍体之间单株的表达差异 | 第99-102页 |
·单倍体单株的所有器官中激活和沉默位点比较 | 第99-100页 |
·不同单倍体单株中总体变化位点在各个器官中的比较 | 第100-101页 |
·同一位点在不同单倍体单株中的差异表达 | 第101-102页 |
9 同一单倍体的整体表达变化 | 第102-104页 |
第四部分 讨论 | 第104-117页 |
1 关于减数分裂中的正常染色体数的配子与异交结实率 | 第104页 |
2 双胚苗水稻中的倍性变化和甲基化研究的优势 | 第104-105页 |
3 水稻单倍体基因组的甲基化率 | 第105页 |
4 单倍化与甲基化模式的改变 | 第105-106页 |
5 关于甲基化变异的位点特异性 | 第106页 |
6 芯片中的倍性敏感序列在表达量的调节 | 第106-107页 |
7 倍性敏感序列与成簇分布 | 第107页 |
8 单倍体与9311的功能分类 | 第107-108页 |
9 基因芯片分析数据与RT-PCR结果的差异 | 第108页 |
10 单倍体中不同器官的RT-PCR的差异 | 第108-109页 |
11 cDNA-AFLP技术的可靠性 | 第109页 |
12 单倍化后植株在RNA水平发生的激活和沉默 | 第109-111页 |
13 单倍化后cDNA-AFLP技术中的表达模式的变化 | 第111-112页 |
14 关于cDNA-AFLP技术中的特异性 | 第112-113页 |
15 沉默与激活比例差异 | 第113-114页 |
16 RT-PCR与cDNA-AFLP中的器官特异性比较 | 第114-115页 |
17 DNA与RNA水平的比较 | 第115页 |
18 基因表达与进化的关系 | 第115-117页 |
第五部分 参考文献 | 第117-126页 |
致谢 | 第126-128页 |
在读期间发表论文情况 | 第128页 |