| 目录 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 一 前言 | 第7-13页 |
| ·MAP30的研究进展 | 第8-10页 |
| ·α-苦瓜素研究进展 | 第10-13页 |
| 二 MAP30基因的克隆和原核表达的研究 | 第13-41页 |
| 1 MAP30基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第13-23页 |
| ·材料 | 第13页 |
| ·方法 | 第13-16页 |
| ·DNA的提取 | 第13页 |
| ·引物设计 | 第13-14页 |
| ·PCR反应条件 | 第14页 |
| ·克隆 | 第14-15页 |
| ·原核表达载体pET28a-M的构建 | 第15页 |
| ·原核表达载体pET32a-M的构建 | 第15页 |
| ·MAP30基因植物表达载体的构建 | 第15页 |
| ·感受态DH5α细胞的制备 | 第15页 |
| ·转化子的鉴定 | 第15-16页 |
| ·结果 | 第16-20页 |
| ·讨论 | 第20-23页 |
| 2 MAP30原核表达的研究 | 第23-41页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·MAP30融合蛋白的表达及优化 | 第23-24页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第24页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| ·Western blot | 第25-26页 |
| ·MAP30对超螺旋DNA的切割作用(王临旭等，2004) | 第26页 |
| ·重组蛋白的抑菌效果： | 第26页 |
| ·结果 | 第26-36页 |
| ·MAP30融合蛋白在BL21(DE3)蛋白的表达 | 第26-27页 |
| ·pET28a-M在Rosstle~(TM)(DE3)pLysS的表达 | 第27-32页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第32-35页 |
| ·Western blot | 第35页 |
| ·MAP30对超螺旋DNA的切割作用 | 第35页 |
| ·重组蛋白的抑菌效果： | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-41页 |
| 三 α苦瓜素基因的克隆和原核表达的研究 | 第41-54页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·苦瓜素基因的克隆 | 第41页 |
| ·表达载体pET28-MCA的构建 | 第41页 |
| ·α苦瓜素融合蛋白表达的优化和纯化 | 第41-42页 |
| ·包涵体的分离和复性 | 第42-43页 |
| ·不同温度和IPTG对诱导蛋白的影响 | 第43页 |
| ·western blot | 第43页 |
| ·α苦瓜素对超螺旋DNA的切割作用 | 第43页 |
| ·重组蛋白α苦瓜素的抑菌效果： | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-51页 |
| ·α苦瓜素基因的克隆和表达载体的构建 | 第44页 |
| ·融合蛋白表达的优化和纯化 | 第44-48页 |
| ·包涵体的纯化 | 第48-50页 |
| ·Western blot | 第50页 |
| ·α苦瓜素对超螺旋DNA的切割作用 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白α苦瓜素的抑菌效果： | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 四、菜豆几丁质酶基因的克隆和植物表达载体的构建 | 第54-57页 |
| ·前言 | 第54页 |
| ·材料和方法 | 第54-55页 |
| ·菜豆几丁质酶CH5B基因的克隆和原核表达载体pET28-CHI的构建 | 第54-55页 |
| ·菜豆几丁质酶CH5B基因pCAMBI2303-CH5B的植物表达载体的构建 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-56页 |
| ·菜豆几丁质酶CH5B基因的克隆和原核表达载体pET28-CHI的构建 | 第55-56页 |
| ·菜豆几丁质酶CH5B基因的植物表达载体的构建 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附图 | 第63-68页 |
