| 目录 | 第1-8页 |
| 缩写表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-37页 |
| 第一章 受体激酶及其信号转导在植物生长发育中的作用 | 第12-23页 |
| 1．1 植物类受体激酶的进化 | 第12-14页 |
| 1．1．1 植物和动物类受体激酶的比较 | 第12-13页 |
| 1．1．2 植物类受体激酶家族 | 第13-14页 |
| 1．2 植物类受体激酶在发育过程中的作用 | 第14-19页 |
| 1．2．1 参与分生组织形成 | 第14-16页 |
| 1．2．2 调控花粉／柱头的相互作用 | 第16页 |
| 1．2．3 参与植物激素的信号转导 | 第16-17页 |
| 1．2．4 参与配子体发育 | 第17页 |
| 1．2．5 参与细胞形态建成和分化 | 第17-18页 |
| 1．2．6 调控植物器官的生长发育 | 第18页 |
| 1．2．7 启动体细胞胚胎发生 | 第18-19页 |
| 1．3 类受体激酶的信号转导 | 第19-22页 |
| 1．3．1 信号配基 | 第19-20页 |
| 1．3．2 类受体激酶信号转导的下游组分 | 第20-22页 |
| 1．4 水稻中的类受体激酶 | 第22-23页 |
| 第二章 RNAi技术在植物功能基因组学研究中的应用 | 第23-28页 |
| 2．1 RNAi的发现过程 | 第23-24页 |
| 2．2 RNAi的作用机理 | 第24-26页 |
| 2．2．1 RNAi的作用途径 | 第24页 |
| 2．2．2 参与RNAi过程的酶 | 第24-26页 |
| 2．3 RNAi的特点 | 第26-27页 |
| 2．3．1 RNAi序列的特异性 | 第26页 |
| 2．3．2 RNAi的高效性 | 第26-27页 |
| 2．3．3 RNAi的特殊穿越能力 | 第27页 |
| 2．4 RNAi技术在植物功能基因组学中的应用 | 第27-28页 |
| 第三章 农杆菌介导的水稻的遗传转化 | 第28-36页 |
| 3．1 水稻遗传转化方法 | 第28-29页 |
| 3．1．1 花粉管通道法 | 第28页 |
| 3．1．2 原生质体直接导入法 | 第28-29页 |
| 3．1．3 基因枪法 | 第29页 |
| 3．1．4 农杆菌介导法 | 第29页 |
| 3．2 农杆菌介导法转化单子叶植物的研究进展 | 第29-32页 |
| 3．2．1 农杆菌介导的遗传转化的机理 | 第30-31页 |
| 3．2．2 农杆菌介导的遗传转化的优越性 | 第31页 |
| 3．2．3 农杆菌介导的遗传转化在水稻中的应用 | 第31-32页 |
| 3．3 农杆菌介导法转化水稻的影响因素 | 第32-35页 |
| 3．3．1 水稻基因型 | 第32页 |
| 3．3．2 转化受体 | 第32-33页 |
| 3．3．3 农杆菌菌株与载体类型 | 第33页 |
| 3．3．4 Vir区基因的诱导 | 第33-34页 |
| 3．3．5 培养基组成和合适的培养条件 | 第34页 |
| 3．3．6 标记基因及筛选剂的选择 | 第34-35页 |
| 3．4 表达载体构建 | 第35-36页 |
| 3．4．1 启动子 | 第35页 |
| 3．4．2 终止子 | 第35页 |
| 3．4．3 报告基因 | 第35-36页 |
| 3．4．4 标记基因 | 第36页 |
| 第四章 研究的目的和内容 | 第36-37页 |
| 第二篇 研究报告 | 第37-64页 |
| 第一章 表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)的构建 | 第37-44页 |
| 1．1 材料和试剂 | 第37页 |
| 1．2 实验方法 | 第37-40页 |
| 1．2．1 日本晴基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| 1．2．2 RNAi片段(OsCR4i和OsPRK2i)的扩增 | 第38页 |
| 1．2．3 RNAi(OsCR4i和OsPRK2i)片段测序 | 第38-39页 |
| 1．2．4 中间载体(pTCK303-CR4i-1、pTCK303-PRK2i-1)的构建 | 第39页 |
| 1．2．5 双元表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)的构建 | 第39-40页 |
| 1．2．6 双元表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)转化农杆菌 | 第40页 |
| 1．3 实验结果 | 第40-44页 |
| 1．3．1 日本晴基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| 1．3．2 RNAi片段(OsCR4i和OsPRK2i)的扩增 | 第41页 |
| 1．3．3 RNAi片段(OsCR4i和OsPRK2i)测序 | 第41-42页 |
| 1．3．4 中间载体(pTCK303-CR4i-1、pTCK303-PRK2i-1)的构建 | 第42-43页 |
| 1．3．5 双元表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)的构建 | 第43页 |
| 1．3．6 双元表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)转化农杆菌 | 第43-44页 |
| 第二章 农杆菌介导pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i转化水稻 | 第44-51页 |
| 2．1 材料和试剂 | 第45页 |
| 2．2 实验方法 | 第45-48页 |
| 2．2．1 愈伤组织的诱导和继代培养 | 第45页 |
| 2．2．2 农杆菌的培养 | 第45页 |
| 2．2．3 共培养 | 第45-46页 |
| 2．2．4 选择培养 | 第46页 |
| 2．2．5 分化培养 | 第46页 |
| 2．2．6 壮苗培养 | 第46页 |
| 2．2．7 各种培养基列表 | 第46-47页 |
| 2．2．8 转化条件的优化 | 第47-48页 |
| 2．3 实验结果 | 第48-51页 |
| 第三章 转基因水稻的分子生物学鉴定及表型观察 | 第51-58页 |
| 3．1 材料和试剂 | 第52页 |
| 3．2 实验方法 | 第52-54页 |
| 3．2．1 转基因植株的GUS染色 | 第52页 |
| 3．2．2 半定量RT-PCR检测转基因植株的转录本 | 第52-54页 |
| 3．2．3 转基因植株的表型观察 | 第54页 |
| 3．3 实验结果 | 第54-58页 |
| 3．3．1 转基因植株的GUS染色 | 第54页 |
| 3．3．2 RNA的电泳检测 | 第54-55页 |
| 3．3．3 半定量RT-PCR检测转基因植株的转录本 | 第55-56页 |
| 3．3．4 转基因植株的表型观察 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-63页 |
| 4．1 表达载体(pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i)的构建 | 第58-59页 |
| 4．1．1 载体的构建 | 第58页 |
| 4．1．2 农杆菌的鉴定 | 第58-59页 |
| 4．1．3 dsRNA的选择 | 第59页 |
| 4．1．4 影响RNAi干涉效率的因素 | 第59页 |
| 4．2 农杆菌介导pTCK303-CR4i、pTCK303-PRK2i转化水稻 | 第59-61页 |
| 4．2．1 愈伤状态的调控 | 第59-60页 |
| 4．2．2 共培养培养条件的优化 | 第60页 |
| 4．2．3 如何增强抑菌效果 | 第60页 |
| 4．2．4 如何提高绿苗分化率 | 第60-61页 |
| 4．2．5 如何提高转基因小苗成活率 | 第61页 |
| 4．3 转基因水稻的分子生物学鉴定及表型观察 | 第61-63页 |
| 4．3．1 GUS报告基因的选择 | 第61页 |
| 4．3．2 半定量RT-PCR检测转录本的注意事项 | 第61-62页 |
| 4．3．3 转基因水稻的表型观察 | 第62-63页 |
| 第五章 结论和需要进一步解决的问题 | 第63-64页 |
| 5．1 结论 | 第63页 |
| 5．2 需要进一步解决的问题 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录Ⅰ 主要培养基母液及贮存液配制 | 第71-74页 |
| 附录Ⅱ RNAi载体构建示意图 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简历 | 第76页 |
