| 摘要 | 第1-8页 |
| 第一章 检测口蹄疫病毒基因芯片的研究 | 第8-33页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| ·口蹄疫研究概述 | 第8-15页 |
| ·病原特征 | 第8页 |
| ·口蹄疫病毒分子生物学研究进展 | 第8-10页 |
| ·口蹄疫病毒的遗传变异 | 第10-12页 |
| ·口蹄疫分子流行病学研究技术 | 第12-13页 |
| ·口蹄疫的诊断方法 | 第13页 |
| ·口蹄疫疫苗研究进展 | 第13-14页 |
| ·口蹄疫防制 | 第14-15页 |
| ·基因芯片技术 | 第15-16页 |
| ·技术原理 | 第15页 |
| ·寡核苷酸芯片 | 第15页 |
| ·寡核苷酸芯片在病毒感染诊断中的应用 | 第15-16页 |
| 2 研究目的及意义 | 第16页 |
| 3 材料和方法 | 第16-26页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·毒株 | 第16页 |
| ·菌株、质粒载体和细胞 | 第16页 |
| ·工具酶及主要试剂盒 | 第16-18页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第18页 |
| ·芯片相关材料及试剂 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-26页 |
| ·病毒培养 | 第19页 |
| ·引物和探针设计 | 第19-21页 |
| ·病毒基因组RNA提取 | 第21页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR产物的检测 | 第22页 |
| ·RT-PCR产物的回收 | 第22页 |
| ·RT-PCR产物克隆至T载体 | 第22页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第22-23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·质粒的少量制备(碱裂解法) | 第23页 |
| ·毒株序列分析和杂交结果预测 | 第23页 |
| ·芯片的制备及质量控制 | 第23-24页 |
| ·杂交反应 | 第24-26页 |
| ·扫描检测 | 第26页 |
| 4 结果 | 第26-30页 |
| ·5株国内分离毒株VP1基因RT-PCR扩增及序列分析结果 | 第26-28页 |
| ·芯片的制备及检测 | 第28页 |
| ·杂交结果 | 第28-30页 |
| 5 讨论 | 第30-32页 |
| 6 结论 | 第32-33页 |
| 第二章 口蹄疫3B-ELISA鉴别诊断方法的初步建立 | 第33-43页 |
| 1 研究目的和意义 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-38页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·口蹄疫病毒 | 第33-34页 |
| ·质粒、菌株、工具酶及其它试剂盒 | 第34页 |
| ·主要溶液 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·血清与抗体 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·口蹄疫病毒RNA的提取 | 第35页 |
| ·3B基因的克隆和表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·3B融合蛋白的表达 | 第36页 |
| ·蛋白质斑点杂交 | 第36页 |
| ·3B-ELISA的建立 | 第36-37页 |
| ·特异性试验和重复性试验 | 第37页 |
| ·与进口ELISA试剂盒的比较试验 | 第37页 |
| ·临床样本检测 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-41页 |
| ·FMDV 3B基因的RT-PCR扩增、克隆及表达载体的鉴定 | 第38页 |
| ·表达产物SDS-PAGE及蛋白质斑点杂交结果 | 第38-39页 |
| ·3B-ELISA的建立 | 第39-41页 |
| ·3B-ELISA最佳条件的确定 | 第39页 |
| ·3B-ELISA阴阳界线的确定 | 第39页 |
| ·特异性试验和重复性试验 | 第39-40页 |
| ·与UBI NS-ELISA试剂盒比较 | 第40页 |
| ·临床样品检测结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41页 |
| 5 结论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
