第一章 前言 | 第1-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
实验材料 | 第18-23页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·实验材料与试剂 | 第18-20页 |
·溶液的配制 | 第20-23页 |
实验方法 | 第23-36页 |
第三章 结果与讨论 | 第36-62页 |
·重组质粒的构建 | 第36-45页 |
1 PCR 扩增 His6-IL2 基因 | 第36页 |
2 克隆载体 pcDNAII EcoRV /His6-IL2 的酶切鉴定 | 第36-37页 |
3 表达载体 pET-30a/His6-IL2 的酶切鉴定 | 第37-38页 |
4 目的片段 DAB389-IL2 与表达载体 pET-28a 的回收结果 | 第38页 |
5 表达载体 pET-28a /His6-DAB389-IL2 的酶切鉴定 | 第38-39页 |
6 重组质粒测序鉴定 | 第39-45页 |
·目的蛋白的表达纯化 | 第45-57页 |
·重组质粒在表达菌 E.coli BL-21 中的诱导表达 | 第45-50页 |
·pET-28a/His6-DAB389-IL2 的诱导表达 | 第45-47页 |
·pET-28a/His6-DAB389-IL2 的诱导表达条件 | 第47-49页 |
·pET-30a/His6-IL2 的诱导表达 | 第49-50页 |
·His6-DAB389-IL2 的纯化 | 第50-57页 |
·His6-DAB389-IL2 蛋白变性液的制备 | 第50-51页 |
·His6-DAB389-IL2 蛋白金属螯合层析纯化 | 第51-52页 |
·His6-DAB389-IL2 纯化蛋白的鉴定 | 第52-57页 |
·DAB389-IL2 蛋白的 mPEG 化修饰 | 第57-62页 |
·His6-DAB389-IL2 的 mPEG 修饰物的制备 | 第57页 |
·mPEG-his6-DAB389-IL2 的纯化 | 第57-58页 |
·mPEG-his6-DAB389-IL2 的生物活性测定 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
附录 | 第67-68页 |
中文摘要 | 第68-71页 |
英文摘要 | 第71-74页 |
致谢 | 第74-75页 |