| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-41页 |
| ·植酸酶研究进展 | 第15-30页 |
| ·植酸酶的来源和酶学性质 | 第15-20页 |
| ·植酸酶作用机理 | 第20页 |
| ·植酸酶的分子生物学 | 第20-23页 |
| ·植酸酶基因工程 | 第23-26页 |
| ·植酸酶的应用 | 第26-29页 |
| ·存在问題和研究展望 | 第29-30页 |
| ·毕赤酵母表达系统研究进展 | 第30-41页 |
| ·毕赤酵母的生物学和遗传学特性 | 第30-31页 |
| ·毕赤酵母表达外源蛋白的优点 | 第31页 |
| ·毕赤酵母表达系统的组成 | 第31-33页 |
| ·外源蛋白的表达 | 第33-36页 |
| ·影响外源蛋白在P.pastoris表达系统中高效表达的因素 | 第36-37页 |
| ·外源蛋白在P.pastoris中的高效表达策略 | 第37-40页 |
| ·前景与展望 | 第40-41页 |
| 第2章 引言 | 第41-45页 |
| ·研究目的和意义 | 第41-42页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第42-44页 |
| ·研究内容 | 第42-43页 |
| ·技术路线 | 第43-44页 |
| ·研究目标 | 第44-45页 |
| 第3章 植酸酶高产菌株黑曲霉N14的选育 | 第45-53页 |
| ·材料与方法 | 第45-47页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-50页 |
| ·标准磷曲线的绘制 | 第47页 |
| ·植酸酶产生菌的筛选 | 第47-48页 |
| ·植酸酶产生菌03214号菌株的初步鉴定 | 第48-49页 |
| ·诱变结果 | 第49-50页 |
| ·遗传稳定性考查 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| ·植酸酶产生菌的筛选 | 第50-51页 |
| ·植酸酶活性测定方法的选择 | 第51页 |
| ·植酸酶产生菌的诱变 | 第51-53页 |
| 第4章 黑曲霉N14植酸酶基因的克隆与分析 | 第53-65页 |
| ·材料与方法 | 第53-56页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-62页 |
| ·黑曲霉N14基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶基因的PCR扩增与回收 | 第57页 |
| ·植酸酶基因的克隆和鉴定 | 第57-58页 |
| ·植酸酶phyA基因的序列分析 | 第58-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·植酸酶基因的获得 | 第62-64页 |
| ·序列比较分析 | 第64-65页 |
| 第5章 诱变前后植酸酶基因及部分酶学性质的比较分析 | 第65-75页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-74页 |
| ·黑曲霉03214植酸酶基因的PCR扩增与回收 | 第66页 |
| ·黑曲霉03214植酸酶基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·黑曲霉N14、03214植酸酶phyA基因序列的比较分析 | 第67-73页 |
| ·黑曲霉N14、03214植酸酶部分酶学性质的比较 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·黑曲霉N14和03214菌株植酸酶基因的比较 | 第74页 |
| ·黑曲霉N14和03214菌株植酸酶特性的比较 | 第74-75页 |
| 第6章 植酸酶基因工程菌的构建与表达分析 | 第75-90页 |
| ·材料与方法 | 第75-80页 |
| ·材料 | 第75-76页 |
| ·方法 | 第76-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-87页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶phyA基因表达片段的PCR扩增 | 第80页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶基因表达片段的克隆、筛选及鉴定 | 第80-82页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶phyA基因表达载体的构建及鉴定 | 第82-83页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶基因重组表达载体的测序分析 | 第83-85页 |
| ·酵母的电击转化与筛选 | 第85页 |
| ·重组酵母的PCR鉴定 | 第85页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第85-86页 |
| ·表达产物植酸酶部分酶学性质 | 第86页 |
| ·重组酵母的遗传稳定性 | 第86-87页 |
| ·重组酵母植酸酶表达量与诱导培养时间的关系 | 第87页 |
| ·讨论 | 第87-90页 |
| ·黑曲霉N14植酸酶phyA基因表达片段的扩增 | 第87-88页 |
| ·表达载体的选择 | 第88页 |
| ·表达载体线性化方式对植酸酶表达的影响 | 第88-89页 |
| ·工程菌植酸酶酶学性质 | 第89-90页 |
| 第7章 小结 | 第90-92页 |
| ·植酸酶高产菌株的获得 | 第90页 |
| ·Aspergillus nigerN14植酸酶phyA基因的获得 | 第90页 |
| ·诱变前后植酸酶基因及部分酶学性质的比较 | 第90-91页 |
| ·植酸酶基因工程菌的获得 | 第91页 |
| ·重组植酸酶部分酶学性质 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
