| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 综述 | 第10-33页 |
| 1 植物抗病基因研究进展 | 第10-11页 |
| ·植物抗病基因 | 第10页 |
| ·已经分离的植物抗病基因及其特点 | 第10-11页 |
| 2 植物抗病基因克隆的方法 | 第11-15页 |
| ·已知基因表达产物的基因克隆 | 第11-12页 |
| ·蛋白质序列起始克隆法 | 第11-12页 |
| ·蛋白质功能互补克隆法 | 第12页 |
| ·未知基因表达产物的克隆 | 第12-15页 |
| ·基因标签法 | 第12页 |
| ·同源PCR技术 | 第12-13页 |
| ·表达差异筛选克隆法 | 第13-14页 |
| ·图位克隆 | 第14-15页 |
| 3 分子标记的研究进展 | 第15-24页 |
| ·基于DNA分子杂交的分子标记 | 第16-17页 |
| ·染色体原位杂交 | 第16页 |
| ·限制性片段长度多态性 | 第16-17页 |
| ·可变数目串联重复序列 | 第17页 |
| ·基于PCR技术的分子标记 | 第17-21页 |
| ·随机引物的PCR标记 | 第17-19页 |
| ·ISSR标记 | 第18页 |
| ·随机扩增多态性DNA | 第18-19页 |
| ·特异引物的PCR标记 | 第19-21页 |
| ·简单序列重复 | 第19-20页 |
| ·特异序列扩增区域 | 第20页 |
| ·序列标签位点 | 第20-21页 |
| ·基于限制性酶切和PCR的分子标记 | 第21-22页 |
| ·扩增片段长度多态性 | 第21-22页 |
| ·酶切扩增片段多态性序列 | 第22页 |
| ·新型分子标记 | 第22-24页 |
| ·单核苷酸多态 | 第22-23页 |
| ·表达序列标签 | 第23-24页 |
| 4 基因组文库载体研究进展 | 第24-28页 |
| ·酵母人工染色体 | 第25页 |
| ·细菌人工染色体 | 第25-26页 |
| ·P1克隆系统和源于P1的人工染色体 | 第26页 |
| ·哺乳动物人工染色体 | 第26-27页 |
| ·双元细菌人工染色体 | 第27页 |
| ·可转化人工染色体 | 第27-28页 |
| 5 立题的意义和技术路线 | 第28-33页 |
| ·立题的意义 | 第28-32页 |
| ·水稻白叶枯病及其抗性基因 | 第28-29页 |
| ·抗白叶枯病基因的定位 | 第29页 |
| ·Xa21、Xa1基因的分离克隆 | 第29-31页 |
| ·Xa23基因 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| 材料和方法 | 第33-46页 |
| 1 试验材料 | 第33-37页 |
| ·亲本和分离群体 | 第33页 |
| ·水稻白叶枯病菌系 | 第33页 |
| ·定位材料 | 第33页 |
| ·基因组TAC文库载体pYLTAC27的示意图 | 第33-34页 |
| ·载体pYLTAC27上的特异引物的序列以及各酶切位点图 | 第34页 |
| ·水稻明恢63TAC文库 | 第34页 |
| ·PCR引物 | 第34-35页 |
| ·试剂及耗材 | 第35页 |
| ·仪器设备 | 第35页 |
| ·主要试剂配方 | 第35-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-46页 |
| ·亲本(JG30、CBB23)和F_2单株群体基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·水稻明恢63TAC文库的筛选 | 第38页 |
| ·TAC克隆的亚克隆文库的构建 | 第38页 |
| ·亚克隆探针的制备 | 第38-39页 |
| ·用质粒拯救的方法获取阳性克隆的左右末端 | 第39页 |
| ·用Tail-PCR的方法获取阳性克隆的左右末端 | 第39-40页 |
| ·RFLP分析 | 第40-41页 |
| ·总DNA的酶切、电泳及Southern Blot膜的制备 | 第40页 |
| ·分子杂交 | 第40-41页 |
| ·特异片段70N的克隆 | 第41-46页 |
| ·特异片段的回收纯化 | 第41-43页 |
| ·PCR产物连接 | 第43页 |
| ·电激转化 | 第43页 |
| ·DNA质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·保存菌种 | 第44页 |
| ·酶切检测 | 第44-45页 |
| ·PCR检测 | 第45-46页 |
| 结果与分析 | 第46-52页 |
| 1 质粒拯救法分离阳性克隆70M12的L末端 | 第46页 |
| 2 用Tail-PCR的方法分离阳性克隆70M12的R末端 | 第46-47页 |
| 3 亲本多态性分析 | 第47-48页 |
| 4 用于RFLP分析的F_2群体 | 第48页 |
| 5 F_2群体遗传距离分析 | 第48-49页 |
| 6 70N克隆的检测 | 第49-50页 |
| 7 用亚克隆文库的部分亚克隆为探针进行亲本多态性分析 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 1 分离阳性克隆末端的方法 | 第52页 |
| 2 水稻抗白叶枯病Xa23基因的精细定位 | 第52-54页 |
| 3 水稻明恢63TAC文库的克隆与Xa23的近等基因系CBB23／JG30的同源性分析 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
