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地衣芽孢杆菌0204高温α-淀粉酶编码基因的克隆、序列分析和初步表达

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1 前言第9-15页
   ·α-淀粉酶的性质与产生菌第9页
   ·耐高温α-淀粉酶的应用第9-10页
     ·在制糖工业中的应用第10页
     ·在其他工业中的应用第10页
   ·耐高温α-淀粉酶的改性第10-14页
     ·α-淀粉酶的结构与功能关系第10-11页
     ·淀粉液化工艺对α-淀粉酶性能改进的要求第11-12页
     ·耐高α-淀粉酶酶活和热稳定性的提高第12-13页
     ·酸性α-淀粉酶的研究第13-14页
   ·本课题的研究目标和研究内容第14-15页
2 材料与方法第15-21页
   ·菌株和质粒第15页
   ·工具酶和试剂第15-16页
   ·培养基和培养条件第16页
   ·转化方法第16-17页
   ·B.licheniformis 0204染色体的提取第17-18页
   ·DNA操作技术第18页
   ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶基因的PCR扩增第18-19页
   ·耐高温α-淀粉酶酶活测定第19-20页
   ·SDS-PAGE第20页
   ·发酵试验第20页
   ·主要仪器第20-21页
3 结果第21-36页
   ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶编码基因的克隆第21-23页
     ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶基因片段amyl’的扩增与重组质粒的构建第21页
     ·反向PCR扩增B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶基因上下游序列第21-23页
   ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶与其它微生物α-淀粉酶之间的进化关系第23-26页
     ·B.licheniformis 0204与584淀粉酶的氨基酸序列比较第23-24页
     ·B.licheniformis 0204 α-淀粉酶与其它微生物α-淀粉酶之间的进化关系第24-26页
   ·质粒转化大肠杆菌和地衣芽孢杆菌方法的优化第26-28页
     ·生长培养基中加入不同高渗溶液对电转化效率的影响第26页
     ·恢复培养基中加入不同高渗溶液对电转化效率的影响第26-27页
     ·电场强度对电转化率的影响第27页
     ·恢复培养基中甘露醇浓度对地衣芽孢杆菌0204电转化率的影响第27-28页
     ·恢复培养基中的蔗糖浓度对E.coli JM109电转化率的影响第28页
     ·地衣芽孢杆菌0204最佳电转化条件第28页
   ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶基因在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的表达第28-31页
   ·B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶全长基因amyl的扩增与整合片段amyl-Ωkm的构建第31-32页
   ·重组子α-淀粉酶酶活测定第32-34页
     ·在大肠杆菌中表达有活性的B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶第32-33页
     ·在地衣芽孢杆菌中表达有活性的B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶第33-34页
   ·SDS-PAGE电泳显示B.licheniformis 0204高温α-淀粉酶在大肠杆菌中得到了较好表达第34页
   ·重组酶的酶学性质第34-36页
4 讨论第36-38页
论文主要结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-43页
硕士研究生期间发表的论文第43-47页

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