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抗除草剂bar基因表达载体的构建及农杆菌转化的研究

中文摘要第1-7页
外文摘要第7-9页
引言第9-20页
 1 抗除草剂基因工程研究概况第9-13页
 2 外源基因表达载体的构建第13-14页
 3 小麦遗传转化方法的研究进展第14-17页
 4 研究意义和研究内容第17-20页
材料与方法第20-34页
 1 试验材料第20-21页
 2 试验方法第21-34页
   ·bar基因的克隆第21-26页
   ·原核表达载体构建、转化及表达蛋白的鉴定第26-28页
   ·真核表达载体pBI121-bar构建及转化农杆菌LBA4404第28-30页
   ·农杆菌转化小麦体系的研究第30-34页
结果与分析第34-54页
 1 bar基因克隆第34-39页
   ·涂叶检测第34页
   ·小麦基因组DNA的提取第34页
   ·bar基因的PCR扩增与检测第34-36页
   ·重组质粒的鉴定第36-38页
   ·bar基因序列的测定第38-39页
 2 原核表达载体构建及表达蛋白的鉴定第39-45页
   ·原核表达载体pET32a-bar的构建第39-41页
   ·细胞总蛋白分析第41-44页
   ·DTNB比色法鉴定表达蛋白酶(PAT)活性第44-45页
 3 真核表达载体pBI121-bar构建及转化农杆菌LBA4404第45-49页
   ·中间载体的构建第45-46页
   ·真核表达载体pBI121-bar构建第46-48页
   ·真核表达载体pBI121-bar转化农杆菌LBA4404(工程菌株的构建)第48-49页
 4 农杆菌转化小麦体系的研究第49-54页
   ·小麦再生体系的研究第49-52页
   ·遗传转化体系的研究第52-54页
讨论第54-59页
 1 PCR克隆第54-55页
 2 原核生物中表达第55-56页
 3 真核表达载体的构建及转化农杆菌第56页
 4 农杆菌转化小麦体系的研究第56-59页
结论第59-60页
参考文献第60-67页
附图第67-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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