缩略词 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
·转录因子的结构特性 | 第11-15页 |
·转录因子在信号转导中的作用 | 第11-13页 |
·与SA-,JA-和ET-信号途径相关的防御相关基因的表达 | 第12页 |
·转录因子在信号转导中的作用 | 第12-13页 |
·转录因子的结构特性 | 第13-15页 |
·DNA结合区 | 第13-14页 |
·转录调控区 | 第14-15页 |
·核定位信号区 | 第15页 |
·寡聚化位点 | 第15页 |
·转录因子的活性调节 | 第15-17页 |
·转译后修饰 | 第16页 |
·二聚体化作用 | 第16-17页 |
·细胞核定位 | 第17页 |
·转录因子与植物的抗逆性 | 第17-25页 |
·转录因子的调控作用 | 第17-20页 |
·转录因子的重要成员及其调控功能 | 第18-20页 |
·ERF在植物抗逆反应中的作用 | 第20-25页 |
·ERF家族成员及其结构特征 | 第20-22页 |
·ERF家族成员在信号转导中的作用 | 第22-25页 |
·论文的设计思路及实验方法 | 第25-27页 |
·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
第二章 实验研究报告 | 第27-52页 |
·JERFs基因细胞核定位植物表达载体的构建以及农杆菌阳性菌株的获得 | 第27-38页 |
·材料与方法 | 第27页 |
·实验材料 | 第27页 |
·酶及试剂 | 第27页 |
·常用溶液配制 | 第27-29页 |
·培养基配制 | 第27-28页 |
·一般溶液的配制 | 第28页 |
·实验试剂配制 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·质粒的提取 | 第29-30页 |
·质粒的酶切 (30μl体系) | 第30页 |
·从质粒载体上扩增所需目的片段(50μl体系) | 第30-31页 |
·PCP产物的回收及酶切 | 第31页 |
·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第31-32页 |
·表达载体的构建 | 第32-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·连接产物对大肠杆菌的转化 | 第34页 |
·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
·电转化农杆菌 | 第35页 |
·阳性农杆菌菌株的鉴定 | 第35页 |
·结果与讨论 | 第35-37页 |
·GFP-pROK2表达载体的鉴定 | 第35-36页 |
·JERFs核定位及删除核定位表达载体的构建 | 第36-37页 |
·农杆菌核定位及删除核定位表达菌体的获得 | 第37页 |
·小结 | 第37-38页 |
·JERFs细胞核定位的瞬时表达实验 | 第38-42页 |
·材料 | 第38页 |
·常用溶液配制 | 第38页 |
·培养基配制 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-39页 |
·根癌农杆菌介导pROK2-GFP-JERFs转化洋葱表皮细胞 | 第38-39页 |
·JERFs细胞核定位的观察 | 第39页 |
·结果与讨论 | 第39-41页 |
·JERFs-GFP-pROK2的瞬时表达 | 第39-40页 |
·DJERFs-GFP-pROK2的瞬时表达 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41页 |
·结论 | 第41-42页 |
·农杆菌介导JERF3转化烟草以及转基因烟草中含GCC-box下游基因表达情况分析 | 第42-52页 |
·材料 | 第42页 |
·常用溶液配制 | 第42-43页 |
·培养基配制 | 第42-43页 |
·基因组DNA提取缓冲液 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·根癌农杆菌介导pROK2-JERF3-GFP,pROK2-DJERF3-GFP转化烟草 | 第43页 |
·鉴定转基因植株 | 第43-45页 |
·Northern杂交检测JERF3基因的表达情况以及含GCC-box的下游基因的表达情况 | 第45-47页 |
·结果与分析 | 第47-52页 |
·烟草的外植体转化、诱导生根及转基因烟草苗的获得。 | 第47-48页 |
·烟草转基因苗的PCR鉴定 | 第48-50页 |
·转基因苗的Northern鉴定以及含GCC box的基因表达情况检测 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61页 |