| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
| 1 离子稳态的重建机制 | 第13-26页 |
| ·跨膜电化学势梯度的重建 | 第14-20页 |
| ·质膜H~+-ATPase | 第14页 |
| ·液泡膜H~+-ATPase | 第14-16页 |
| ·V-H~+-ATPase V_1区 | 第14-16页 |
| ·V-H~+-ATPase V_0区 | 第16页 |
| ·盐胁迫下H~+-ATPase的表达调控 | 第16页 |
| ·V-H~+-PPase | 第16-20页 |
| ·V-H~+-PPase结构 | 第17-18页 |
| ·类型Ⅰ及类型ⅡV-H~+-PPase | 第18页 |
| ·环境胁迫对液泡膜H~+-PPase活性的调节 | 第18-20页 |
| ·K~+、Na~+的稳态 | 第20-24页 |
| ·Na~+内流与K~+吸收 | 第20-22页 |
| ·Na~+外排 | 第22页 |
| ·Na~+区隔化 | 第22-24页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白基因克隆及序列分析 | 第23页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白功能 | 第23-24页 |
| ·Cl~-的吸收和区隔化 | 第24页 |
| ·Ca~(2+)的稳态 | 第24-25页 |
| ·Na~+稳态平衡的调节机制 | 第25-26页 |
| 2 渗透稳态的重建 | 第26-29页 |
| ·渗透稳态 | 第26页 |
| ·与渗透稳态有关的调节途径 | 第26-29页 |
| ·蛋白激酶途径 | 第26-27页 |
| ·磷脂酶途径 | 第27-28页 |
| ·ABA及渗透胁迫信号 | 第28-29页 |
| ·ABA在水分胁迫耐受性方面的作用 | 第28页 |
| ·盐以及干旱胁迫调节ABA合成与降解 | 第28-29页 |
| ·ABA依赖与ABA不依赖的信号转导途径 | 第29页 |
| 3 结论与展望 | 第29-31页 |
| 第二部分 实验论文 | 第31-66页 |
| 实验材料及实验方法 | 第31-44页 |
| 1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-44页 |
| ·盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase putative B、H、c亚基cDNA克隆的分离与测序 | 第32-33页 |
| ·盐地碱蓬及拟南芥总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·Trizol试剂提取植物总RNA | 第33页 |
| ·异硫氰酸胍法提取总RNA | 第33-34页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第34页 |
| ·Northern杂交分析 | 第34-35页 |
| ·在含有甲醛的凝胶上进行RNA电泳 | 第34页 |
| ·RNA杂交膜的制备 | 第34页 |
| ·cDNA探针的制备 | 第34-35页 |
| ·杂交过程 | 第35页 |
| ·Southern杂交分析 | 第35-36页 |
| ·液泡膜微囊的制备 | 第36页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第36页 |
| ·液泡膜H~+-ATPase、H~+-PPase水解活性的测定 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE及Western-blot免疫分析 | 第36-37页 |
| ·蛋白质样品的制备 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳及Western-blot免疫分析 | 第37页 |
| ·基因克隆及双元植物表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·盐地碱蓬SsNHXI基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·拟南芥AVP1基因的克隆 | 第40页 |
| ·双元植物表达载体pCAMBIA1300-SsNHXI-AVP1的构建 | 第40页 |
| ·质粒pRT101-SsNHXI的构建 | 第40页 |
| ·质粒pJIT163-AVP1的构建 | 第40页 |
| ·质粒pCAMBIA1300-SsNHX1的构建 | 第40页 |
| ·双元表达载体pCAMBIA1300-SsNHXI-AVP1的构建 | 第40页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第40-41页 |
| ·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第41页 |
| ·渗透法转化拟南芥 | 第41页 |
| ·转化子的筛选及遗传分析 | 第41-42页 |
| ·转化子的筛选 | 第41-42页 |
| ·转化子的遗传分析 | 第42页 |
| ·转基因植株外源SsNHXI／AVP1基因检测 | 第42-43页 |
| ·转基因植株外源SsNHXI基因的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·转基因植株外源SsNHXI基因的RT-PCR检测 | 第43页 |
| ·转基因植株外源AVP1基因的Western-blot检测 | 第43页 |
| ·野生型与转基因拟南芥植株在含NaCl培养基上的生长情况 | 第43页 |
| ·野生型与转基因拟南芥植株鲜重，干重的测定 | 第43页 |
| ·野生型与转基因拟南芥植株渗透势的测定 | 第43页 |
| ·Na~+、K~+离子含量的测定 | 第43页 |
| ·野生型与转基因拟南芥植株在含LiCl培养基上的生长情况 | 第43-44页 |
| 实验结果与分析 | 第44-66页 |
| 1 盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase putative B、H、c亚基cDNA克隆 | 第44-55页 |
| ·盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase putative B亚基cDNA序列及分析 | 第44-48页 |
| ·盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase putative H亚基cDNA序列及分析 | 第48-52页 |
| ·盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase putative c亚基cDNA序列及分析 | 第52-55页 |
| 2 Southern分析盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase H亚基 | 第55页 |
| 3 NaCl胁迫对盐地碱蓬叶片及根部组织Na~+含量的影响 | 第55-56页 |
| 4 NaCl胁迫对盐地碱蓬液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白SsNHXI基因表达的影响 | 第56页 |
| 5 NaCl胁迫对盐地碱蓬叶片液泡膜H~+-ATPase B、H、c亚基基因表达的影响 | 第56-57页 |
| ·NaCl胁迫时间对盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase H，c亚基基因表达的影响 | 第56-57页 |
| ·不同浓度NaCl胁迫对盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase B、H、c亚基基因表达的影响 | 第57页 |
| 6 NaCl胁迫对不同发育时期、不同组织部位盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase B、H、c亚基基因表达的影响 | 第57-58页 |
| 7 NaCl胁迫对盐地碱蓬叶片液泡膜H~+-PPase基因表达的影响 | 第58页 |
| 8 NaCl胁迫对盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase、H~+-PPase活性的影响 | 第58-59页 |
| 9 NaCl胁迫对盐地碱蓬液泡膜H~+-ATPase，H~+-PPase蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 10 双元植物表达载体pCAMBIA1300-SsNHXI-AVP1的构建及转基因拟南芥表型分析 | 第60-66页 |
| ·双元植物表达载体pCAMBIA1300-SsNHXI-AVP1的构建 | 第60-61页 |
| ·转基因拟南芥表型分析 | 第61-66页 |
| ·转基因拟南芥的筛选 | 第61页 |
| ·纯系转基因植株的获得 | 第61页 |
| ·转基因植株外源SsNHXI基因的PCR与RT-PCR检测 | 第61-62页 |
| ·转基因植株外源AVP1基因的Western-blot检测 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的耐盐性分析 | 第63-66页 |
| ·不同浓度NaCl处理对转基因植株生长的影响 | 第63-65页 |
| ·转基因植株在不同浓度LiCl胁迫下的生长情况 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 图版 | 第79-86页 |
| 附录 | 第86-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读博士学位期间整理发表的论文及参与的科研课题 | 第96页 |
