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应用抑制消减杂交筛选小鼠肾虚证差异表达基因

缩略词表第1-7页
中文摘要第7-8页
英文摘要第8-10页
前言第10-12页
实验研究第12-30页
 1. 材料与方法第12-22页
  1.1  材料第12-14页
   1.1.1  实验动物第12页
   1.1.2  试剂第12页
   1.1.3  合成的引物序列第12-13页
   1.1.4  实验仪器第13-14页
  1.2  方法第14-22页
   1.2.1  动物模型的建立第14页
    1.2.1.1  动物分组第14页
    1.2.1.2  动物造模第14页
   1.2.2  建模前后总cDNA的制备第14-17页
    1.2.2.1  采血第15页
    1.2.2.2  RNA的提取第15页
    1.2.2.3  SMART技术合成cDNA第15-16页
    1.2.2.4  PCR产物的纯化第16页
    1.2.2.5  cDNA的检测第16-17页
   1.2.3  抑制消减杂交第17-19页
    1.2.3.1  杂交前总cDNA的处理第17-18页
    1.2.3.2  消减杂交第18-19页
    1.2.3.3  Nested PCR扩增消减杂交产物第19页
   1.2.4  SSH 产物的进一步分离与回收第19-22页
    1.2.4.1  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离SSH产物第19-20页
    1.2.4.2  从聚丙烯酰胺凝胶中回收cDNA第20-21页
    1.2.4.3  回收后cDNA的扩增、纯化、定量第21-22页
 2. 结果第22-30页
  2.1  动物模型的建立第22页
  2.2  RNA质量检测及cDNA合成第22-25页
   2.2.1  RT-PCR检测RNA质量第22-24页
   2.2.2  SMART技术合成cDNA第24-25页
  2.3  cDNA纯化效率检测第25-26页
  2.4  酶切效果检测第26页
  2.5  Adaptor连接效率检测第26-27页
  2.6  SSH产物检测第27-28页
   2.6.1  琼脂糖凝胶电泳检测SSH产物第27-28页
   2.6.2  PAGE检测SSH产物第28页
  2.7  SSH产物的分离回收第28-30页
讨论第30-46页
 1. 肾虚证造模方法与“恐伤肾”法造模的理论依据第30-39页
  1.1  肾虚证动物模型研究第30-32页
   1.1.1  研究现状第30-31页
    1.1.1.1  肾阳虚证动物模型第30-31页
    1.1.1.2  先天肾虚证动物模型第31页
   1.1.2  本实验造模方法的特点第31-32页
  1.2  “恐伤肾”法造模的理论依据第32-39页
   1.2.1  肾的主要生理功能第32-34页
   1.2.2 “恐伤肾” 的中医理论依据第34页
   1.2.3 “恐伤肾”与应激反应第34-39页
    1.2.3.1  应激时的全身反应综合征第34-35页
    1.2.3.2  应激时的神经内分泌反应第35-36页
    1.2.3.3  应激时的功能代谢变化第36-37页
    1.2.3.4  惊恐应激引起的基因表达的变化第37-38页
    1.2.3.5  糖皮质激素作用原理与应激反应第38-39页
 2. SMART  cDNA 合成技术第39-41页
 3. 抑制消减杂交(SSH)技术第41-46页
  3.1  SSH的技术基础第41-42页
  3.2  SSH流程及原理要点第42-44页
  3.3  SSH的优点第44-45页
  3.4  注意事项第45-46页
结语第46-47页
问题与讨论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-55页
综述:现代分子生物学技术在中医药学中的应用第55-63页
参考文献第63-65页

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