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红肉脐橙(Citrus sinensis [L.] Osbeck)番茄红素β-环化酶基因(Lcyb)功能的初步验证和分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-25页
   ·课题的提出第11-12页
   ·国内外研究进展第12-24页
     ·柑橘红肉突变体的相关研究进展第12页
       ·柑橘红肉突变体中的主要呈色色素第12页
       ·柑橘红肉突变体的变异原因第12页
     ·高等植物类胡萝卜素合成相关基因的研究进展第12-17页
       ·类胡萝卜素生物合成途径第12-14页
       ·类胡萝卜素生物合成关键酶基因的研究进展第14-17页
     ·果树基因克隆及功能验证方法研究进展第17-20页
       ·功能克隆法第18-19页
       ·同源序列法第19页
       ·表达序列标签第19-20页
       ·cDNA-AFLP技术第20页
       ·果树基因的功能验证第20页
     ·农杆菌介导番茄遗传转化研究进展第20-23页
       ·农杆菌介导法的转化机理第21页
       ·影响农杆菌介导番茄遗传转化因素第21-23页
     ·番茄红素β-环化酶(Lcyb)基因转化番茄的研究进展第23-24页
   ·本研究的目的及内容第24-25页
2 材料和方法第25-37页
   ·实验材料第25页
     ·植物材料第25页
     ·细菌材料第25页
   ·主要试剂和仪器第25-26页
     ·主要试剂第25页
     ·仪器第25-26页
   ·引物设计第26-27页
     ·PCR引物序列第26页
     ·RT-PCR引物序列第26页
     ·Real-time PCR引物序列第26-27页
   ·农杆菌介导的Lcyb基因转化番茄第27-28页
   ·转基因番茄植株的分子检测第28-33页
     ·T_0代转化植株的分子检测第28-33页
       ·番茄转化再生植株的DNA提取第28页
       ·转化再生番茄植株的PCR检测第28-29页
       ·T_0代转基因番茄植株的Southern杂交检测第29-33页
     ·T_1代转基因番茄植株的分子鉴定第33页
   ·T_0代转基因番茄果实色差值的测定第33-34页
   ·T_0代转基因番茄果实类胡萝卜素成分和含量的测定第34-35页
   ·RT-PCR检测T_0代转基因番茄果实外源基因表达情况第35-36页
     ·T_0代转基因番茄果实RNA提取第35页
     ·RT-PCR检测T_0代转基因番茄果实外源Lcyb基因表达情况第35-36页
   ·Real-time PCR检测T_0代转基因番茄植株中内源类胡萝卜素合成相关基因的表达第36-37页
3 结果与分析第37-50页
   ·转基因番茄植株的获得第37-38页
   ·转基因番茄植株的分子鉴定第38-41页
     ·T_0代转基因植株PCR检测分析第38-39页
     ·转基因番茄植株的Southern杂交分析第39-40页
     ·转基因植株后代的遗传分析第40-41页
   ·T_0代转基因番茄果实色差值的测定第41-42页
   ·T_0代转基因番茄果实类胡萝卜素成分和含量的变化第42-47页
     ·T_0代转基因番茄果实中类萝卜素的成分第42-43页
     ·T_0代转基因番茄果实中类胡萝卜素含量的变化第43-47页
   ·转基因番茄果实中外源Lcyb基因的表达分析第47页
   ·T_0代转基因番茄植株中类胡萝卜素合成相关基因的表达分析第47-50页
4.讨论第50-53页
   ·红肉脐橙中Lcyb基因两个转录本的功能分析第50页
   ·Lcyb基因与红肉脐橙色泽突变的关系第50-51页
   ·基于本研究的后续工作第51页
   ·类胡萝卜素代谢基因工程在园艺植物育种中的应用前景第51-53页
参考文献第53-61页
图版与图版说明第61-63页
致谢第63页

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