| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·植物多肽激素简介 | 第11-14页 |
| ·系统素 | 第11-12页 |
| ·植物硫肽激素 | 第12页 |
| ·CLAVTA3 | 第12-13页 |
| ·S位点富含半胱氨酸蛋白 | 第13页 |
| ·早期结瘤蛋白40 | 第13-14页 |
| ·快速碱化因子研究进展 | 第14-17页 |
| ·快速碱化因子的发现 | 第14页 |
| ·快速碱化因子的结构 | 第14页 |
| ·快速碱化因子的生理作用 | 第14-15页 |
| ·RALF受体研究 | 第15-16页 |
| ·快速碱化因子在不同植物中的生理作用 | 第16-17页 |
| 第2章 引言 | 第17-19页 |
| ·研究背景及意义 | 第17-18页 |
| ·实验技术路线 | 第18-19页 |
| 第3章 蜡梅快速碱化因子基因的克隆与分子特征 | 第19-33页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·蜡梅花cDNA文库,蜡梅花 | 第19页 |
| ·菌株与载体 | 第19页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第19页 |
| ·自己配制的试剂 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·蜡梅DNA提取及纯化 | 第20-21页 |
| ·蜡梅总RNA提取 | 第21-22页 |
| ·蜡梅cDNA第一链的合成 | 第22页 |
| ·CpRALF基因5’及3’RACE模板合成 | 第22-23页 |
| ·利用3’RACE克隆CpRALF基因3’端cDNA序列 | 第23-26页 |
| ·CpRALF基因的克隆及内含子分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-31页 |
| ·蜡梅花基因组DNA以及总RNA的检测 | 第26-27页 |
| ·CpRALF基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·CpRALF基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第4章 蜡梅快速碱化因子基因原核表达载体的构建及融合蛋白的功能验证 | 第33-45页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株与载体 | 第33页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第33页 |
| ·自己配制的试剂 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测目的融合蛋白 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第38页 |
| ·融合蛋白活性测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的表达与纯化 | 第40页 |
| ·蛋白质纯化及检测 | 第40-42页 |
| ·融合蛋白功能的验证 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第5章 蜡梅快速碱化因子基因CPRALF转录的实时荧光定量表达分析 | 第45-53页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·植物材料以及蜡梅幼苗的获得 | 第45页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·蜡梅组织及不同花期材料的获得 | 第45-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第46-47页 |
| ·CpRALF表达特性的实时荧光定量分析 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·总RNA的提取 | 第48页 |
| ·CpRALF表达分析 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第6章 植物表达载体的构建与转化烟草 | 第53-59页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第53页 |
| ·自己配制的试剂 | 第53页 |
| ·基本培养基配方 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第54页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第54-55页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第7章 总结 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| ·CpRALF分子克隆及其特征 | 第59页 |
| ·原核表达 | 第59页 |
| ·CpRALF的转录表达分析 | 第59页 |
| ·CpRALF的植物表达 | 第59-60页 |
| ·本研究创新点 | 第60页 |
| ·下一步研究计划 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 缩略词表 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 在校期间发表的文章和参与的项目 | 第71页 |
