摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
缩略词 | 第11-13页 |
第一章 绪言 | 第13-31页 |
·蛇毒的主要组成及其毒理 | 第13-15页 |
·神经毒素(NTX) | 第13-14页 |
·细胞毒素(CTX) | 第14-15页 |
·神经生长因子(NGF) | 第15页 |
·蛇毒的抗肿瘤作用研究 | 第15-21页 |
·蛇毒粗毒的抗肿瘤作用研究 | 第15-16页 |
·蛇毒抗肿瘤组分的研究 | 第16页 |
·蛇毒抗肿瘤在临床的应用 | 第16-21页 |
·磷脂酶 A_2简介 | 第21-27页 |
·磷脂酶A_2的分类 | 第22-23页 |
·蛇毒 PLA_2的功能与结构特征 | 第23-27页 |
·磷脂酶A_2的细胞毒性作用 | 第27-29页 |
·磷脂酶A_2的细胞膜受体 | 第27-29页 |
·磷脂酶A_2参与细胞凋亡 | 第29页 |
·本论文的研究意义 | 第29-31页 |
第二章 白眉蝮蛇磷脂酶 A_2的分离纯化及理化性质鉴定 | 第31-48页 |
·实验材料与设备 | 第31-32页 |
·实验材料 | 第31页 |
·实验设备 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-37页 |
·DEAE Sephadex A-25离子交换色谱分离 | 第32页 |
·Sephadex G-75分子筛层析 | 第32页 |
·HPLC反相色谱 | 第32-33页 |
·磷脂酶A_2活性定性检测量 | 第33页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳: Tris-Tricine系统 | 第33-36页 |
·蛋白浓度测定(BCA法) | 第36页 |
·磷脂酶A_2活性定量检测 | 第36-37页 |
·PLA_2活性检测方法 | 第36-37页 |
·最适温度测定 | 第37页 |
·最适pH测定 | 第37页 |
·热稳定性测定 | 第37页 |
·酸碱稳定性测定 | 第37页 |
·实验结果与讨论 | 第37-46页 |
·蛇毒经 DEAE Sephadex A-25初步分离 | 第37-39页 |
·Sephadex G-75脱盐以及进一步分离纯化 | 第39-41页 |
·SDS-PAGE电泳结果 | 第41页 |
·HPLC进一步分离纯化及纯度鉴定 | 第41-42页 |
·蛋白浓度测定 | 第42-43页 |
·PLA_2活性测定 | 第43页 |
·最适温度测定 | 第43页 |
·最适pH测定 | 第43-45页 |
·热稳定性测定 | 第45页 |
·酸碱稳定性测定 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第三章 PLA_2体外抗肿瘤活性研究 | 第48-55页 |
·实验材料及设备 | 第48页 |
·实验材料 | 第48页 |
·实验设备 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·细胞培养 | 第48-49页 |
·PLA_2细胞毒性时间依赖性的测定 | 第49-50页 |
·PLA_2细胞毒性剂量依赖性的测定 | 第50页 |
·MTT测量 | 第50页 |
·实验结果与讨论 | 第50-52页 |
·PLA_2细胞毒性时间依赖关系 | 第50-51页 |
·PLA_2细胞毒性的剂量依赖关系 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
第四章 心脏毒素与CLBP的协同作用效应的研究 | 第55-64页 |
·实验材料与设备 | 第55-57页 |
·实验材料 | 第55-56页 |
·实验设备 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-59页 |
·眼镜蛇毒的分离纯化 | 第57-58页 |
·细胞培养 | 第58-59页 |
·细胞毒性测定 | 第59页 |
·MTT测量 | 第59页 |
·结果 | 第59-63页 |
·CM-Sephadex C-25离子交换色谱结果 | 第59-60页 |
·FPLC进一步分离纯化 | 第60-61页 |
·细胞增殖实验结果 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
第五章 结论 | 第64-67页 |
·分离得到PLA_2同源物 | 第64页 |
·完成PLA_2的酶活测定 | 第64页 |
·PLA_2抗肿瘤活性检测 | 第64-66页 |
·心脏毒素与CLBP的协同作用效应研究 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
附录A 攻读学位期间发表论文目录 | 第77-78页 |
附录B 主要溶液的配制方法 | 第78-79页 |