摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一部分 白眉蝮蛇蛇毒中透明质酸酶的分离纯化及部分理化性质的研究 | 第12-50页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
·蛇毒简介 | 第12-13页 |
·在医学药理学方面 | 第12页 |
·在分子生物学方面 | 第12-13页 |
·透明质酸酶及透明质酸的简介 | 第13-18页 |
·透明质酸酶的研究现状 | 第13-14页 |
·透明质酸酶医学价值的研究现状 | 第14-15页 |
·影响 HAase活性的因素 | 第15-16页 |
·透明质酸酶与肿瘤细胞 | 第16-17页 |
·从蛇毒中分离纯化透明质酸酶的现状 | 第17-18页 |
·本实验的选题依据 | 第18-19页 |
·本实验采用的方法、成果及意义 | 第19-20页 |
第二章 透明质酸酶的分离纯化及部分理化性质研究 | 第20-44页 |
·材料与仪器 | 第20页 |
·材料与试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-24页 |
·CM-Sephadex~(TM) C-25离子交换色谱条件的优化 | 第20-21页 |
·色谱层析 | 第21页 |
·酶活测定 | 第21页 |
·纯度鉴定 | 第21-22页 |
·HAase的含量及各分离纯化步骤后的酶活变化 | 第22-24页 |
·HAase-温度曲线测定 | 第24页 |
·HAase-pH值曲线测定 | 第24页 |
·Na~+对 HAase的影响 | 第24页 |
·用不同浓度的透明质酸为底物测定透明质酸酶的 K_m值 | 第24页 |
·白眉蝮蛇蛇毒中 HAase的保存方法 | 第24页 |
·实验结果 | 第24-37页 |
·CM-Sephadex~(TM) C-25离子交换色谱条件的优化 | 第24-25页 |
·色谱层析 | 第25-29页 |
·酶活测定 | 第29-31页 |
·纯度鉴定 | 第31-32页 |
·HAase的含量及各分离纯化步骤后的酶活变化 | 第32-34页 |
·HAase-温度曲线测定 | 第34页 |
·HAase-pH值曲线测定 | 第34-35页 |
·Na~+对 HAase的影响 | 第35-36页 |
·HAase的反应动力学 | 第36页 |
·白眉蝮蛇蛇毒中 HAase的保存方法 | 第36-37页 |
·分析与讨论 | 第37-44页 |
·前人所做实验 | 第37-39页 |
·本实验所采用流程及所得结果 | 第39-41页 |
·比较 | 第41-44页 |
第三章 透明质酸酶对肿瘤细胞的作用 | 第44-50页 |
·材料与仪器 | 第44页 |
·材料与试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-46页 |
·细胞的复苏 | 第45页 |
·Hela,HepG-2细胞的培养 | 第45页 |
·数据处理 | 第45-46页 |
·实验结果 | 第46-47页 |
·人子宫颈肿瘤细胞(Hela细胞) | 第46页 |
·肝癌细胞(HepG-2细胞) | 第46-47页 |
·分析与讨论 | 第47-48页 |
·建议 | 第48-50页 |
第二部分 眼镜蛇蛇毒中神经毒蛋白对 PC-12细胞作用的初步研究 | 第50-64页 |
1 前言 | 第50-54页 |
·神经毒素简介 | 第50页 |
·神经毒素的分类 | 第50-51页 |
·突触后神经毒素结构性质简介 | 第51-52页 |
·烟碱型乙酰胆碱受体简介 | 第52页 |
·蛇毒 A-神经毒素的研究进展 | 第52-53页 |
·蛇毒 A-神经毒素和受体结合的研究现状 | 第53页 |
·PC-12细胞 | 第53-54页 |
2 研究目的,意义 | 第54页 |
3 材料与仪器 | 第54-56页 |
·神经毒蛋白的提取 | 第55页 |
·材料与试剂 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·细胞实验 | 第55-56页 |
·材料与试剂 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
4 实验方法 | 第56-57页 |
·眼镜蛇蛇毒中神经毒蛋白的提取 | 第56-57页 |
·CM-Sephadex~(TM) C-25离子交换色谱分离离子交换色谱分离 | 第56页 |
·Sephadex~(TM) G-75分子筛色谱分离 | 第56页 |
·纯度鉴定 | 第56-57页 |
·细胞培养及数据处理 | 第57页 |
5 实验结果 | 第57-63页 |
·眼镜蛇蛇毒中神经毒蛋白的提取 | 第57页 |
·纯度鉴定 | 第57-58页 |
·神经毒蛋白对 PC-12细胞的作用 | 第58-63页 |
·各时间点蛋白浓度与抑制率之间的关系 | 第58-61页 |
·时间—抑制率图 | 第61-62页 |
·加神经毒蛋白作用之后的细胞数量对比图 | 第62页 |
·各时间下的IC_(50)值 | 第62-63页 |
6 分析与讨论 | 第63页 |
7 建议 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录A 攻读学位期间发表论文目录 | 第71-72页 |
附录B 缩略词 | 第72页 |