| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-18页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的研究概况 | 第7-10页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的来源及性质 | 第7-8页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的结构研究 | 第8-9页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的主要用途 | 第9-10页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的研究进展 | 第10-13页 |
| ·ADI 抗肿瘤活性临床研究进展 | 第10-11页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的克隆表达 | 第11-13页 |
| ·酶分子的定点突变技术概述 | 第13-16页 |
| ·定点突变技术 | 第13-15页 |
| ·常用定点突变方法优缺点比较 | 第15-16页 |
| ·本论文的研究背景、意义 | 第16页 |
| ·本课题研究思路和研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·培养基和工作液 | 第18-19页 |
| ·实验仪器及设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·利用定点突变法研究精氨酸脱亚胺酶活性的影响机制 | 第20-23页 |
| ·利用定点突变法改善精氨酸脱亚胺酶的酶学性质 | 第23-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-45页 |
| ·利用定点突变法研究ADI 突变株M314 中各位点的酶活影响机制 | 第26-34页 |
| ·定点突变法制备ADI 突变株. | 第26页 |
| ·突变株菌落PCR 验证 | 第26-27页 |
| ·基因序列的测定 | 第27-28页 |
| ·HiPrep DEAE FF 阴离子交换层析 | 第28页 |
| ·SuperdexTM 200 凝胶过滤层析 | 第28-29页 |
| ·WT-ADI 及其突变酶SDS-PAGE 分析 | 第29-30页 |
| ·ADI 野生酶和突变株的酶活力及比活力测定 | 第30页 |
| ·最适反应温度与热稳定性 | 第30-31页 |
| ·最适反应pH 与pH 稳定性 | 第31-32页 |
| ·突变株精氨酸脱亚胺酶动力学参数对比 | 第32页 |
| ·ADI 突变位点的分析 | 第32-34页 |
| ·利用定点突变法对精氨酸脱亚胺酶的改造研究 | 第34-39页 |
| ·定点突变法制备ADI 突变株 | 第34-35页 |
| ·突变株菌落PCR 验证 | 第35页 |
| ·基因序列的测定 | 第35-36页 |
| ·WT-ADI 突变酶的SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| ·ADI 野生酶和突变株的酶活力及比活力测定 | 第37页 |
| ·最适反应温度与热稳定性 | 第37-38页 |
| ·最适反应pH 与pH 稳定性 | 第38-39页 |
| ·WT-ADI 突变株精氨酸脱亚胺酶动力学参数对比 | 第39页 |
| ·利用定点突变法提高突变株M314 的比活力 | 第39-45页 |
| ·基于M314 的D38H 和E296K 突变体的制备 | 第39-40页 |
| ·基因序列的测定 | 第40页 |
| ·突变株 M11，M12 和M13 的纯化 | 第40-41页 |
| ·ADI 野生酶和突变株M11，M12 和M13 的酶活力及比活力测定 | 第41页 |
| ·最适反应温度与热稳定性 | 第41-42页 |
| ·最适反应pH 与pH 稳定性 | 第42页 |
| ·M314 突变株精氨酸脱亚胺酶动力学参数对比 | 第42-43页 |
| ·ADI 突变位点的分析 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 主要结论 | 第45页 |
| 展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
