| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 缩语表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·粪肠球菌简介 | 第9-11页 |
| ·粪肠球菌危害性 | 第9页 |
| ·粪肠球菌耐药机制 | 第9-11页 |
| ·细菌的群体感应系统 | 第11-14页 |
| ·革兰氏阴性菌的AHL-LuxI/LuxR 系统 | 第11-12页 |
| ·寡肽介导的革兰氏阳性菌双组份感应系统 | 第12页 |
| ·LuxS/AI-2 依赖的QS 系统 | 第12-14页 |
| ·QS 系统的干扰 | 第14页 |
| ·粪肠球菌的QS 系统 | 第14-15页 |
| ·Cy1/Cy2 双组份感应系统 | 第14页 |
| ·fsr 感应系统 | 第14-15页 |
| ·论文的研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·主要化学试剂和耗材 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·相关溶液的配制 | 第18-20页 |
| ·AI-2 检测系统的建立 | 第20页 |
| ·粪肠球菌V583 生长曲线与AI-2 活性的关系 | 第20页 |
| ·luxS 和pfs 基因的PCR 扩增与测序 | 第20-21页 |
| ·GST 标签表达载体的构建 | 第21页 |
| ·GST 标签蛋白的表达与纯化 | 第21-22页 |
| ·GST 标签蛋白的Western bloting 验证 | 第22页 |
| ·luxS 基因在DH5α中互补性验证 | 第22页 |
| ·SAH 与重组大肠杆菌菌体蛋白的反应 | 第22页 |
| ·粪肠球菌V583 中AI-2 的合成途径 | 第22-23页 |
| ·埃尔曼试剂测定AI-2 浓度 | 第23页 |
| ·AI-2 与MHF 生物活性的比较 | 第23页 |
| ·双向电泳分析AI-2 生物功能 | 第23-25页 |
| ·半定量 RT-PCR 验证差异基因 | 第25-26页 |
| ·AI-2 刺激下粪肠球菌菌膜变化 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-43页 |
| ·luxS 和pfs 基因的克隆、表达和鉴定 | 第27-29页 |
| ·luxS 和pfs 基因的扩增与序列比对 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白表达纯化和验证 | 第29页 |
| ·基于哈氏弧菌生物发光系统的AI-2 活性检测 | 第29-33页 |
| ·三株粪肠球菌AI-2 活性检测 | 第29-30页 |
| ·粪肠球菌V583 生长曲线与AI-2 活性关系 | 第30-32页 |
| ·luxS 基因在DH5α中互补性验证 | 第32-33页 |
| ·AI-2 的生物合成及活性比较 | 第33-36页 |
| ·SAH 与构建大肠杆菌菌体蛋白的反应 | 第33页 |
| ·粪肠球菌V583 中AI-2 的合成途径 | 第33-34页 |
| ·AI-2 浓度的测定 | 第34-35页 |
| ·AI-2 与MHF 生物活性的比较 | 第35-36页 |
| ·AI-2 生物功能研究 | 第36-43页 |
| ·双向电泳分析AI-2 生物功能 | 第36-40页 |
| ·双向电泳结果的半定量RT-PCR 验证 | 第40-41页 |
| ·AI-2 刺激下粪肠球菌菌膜变化 | 第41-43页 |
| 结论与展望 | 第43-45页 |
| 结论 | 第43页 |
| 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附录A 粪肠球菌luxS 基因序列 | 第53-54页 |
| 附录B 粪肠球菌pfs 基因序列 | 第54-56页 |
| 附录C 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |