摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1 禽腺病毒的生物学特性和分类地位 | 第14-15页 |
2 流行病学 | 第15页 |
3 病毒的生物学特征 | 第15-18页 |
·末端倒置重复序列(ITR) | 第15-16页 |
·E1 | 第16页 |
·E2区 | 第16页 |
·E3/E4 | 第16-17页 |
·晚期结构蛋白 | 第17-18页 |
4 限制性酶切图谱和同源分析 | 第18-19页 |
5 诊断研究进展 | 第19-20页 |
6 腺病毒作为载体研究 | 第20页 |
7 疫苗研究进展 | 第20-21页 |
8 鸡白细胞介素2和18做为佐剂应用研究 | 第21-23页 |
9 研究目的及意义 | 第23-24页 |
第二章 :EDSV纤突蛋白Knob-S区原核表达 | 第24-36页 |
1 材料与方法 | 第24-31页 |
·材料 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-31页 |
2 结果 | 第31-35页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
·重组质粒pMD18-T-Knob-S的PCR和酶切鉴定以及序列分析 | 第32页 |
·重组质粒pET-32(a)-Knob-S的PCR和酶切鉴定 | 第32-33页 |
·重组蛋白表达分析 | 第33-34页 |
·诱导时间的优化 | 第34页 |
·IPTG诱导浓度的优化 | 第34页 |
·纯化蛋白的分析 | 第34页 |
·血凝试验和Western-blot鉴定 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-36页 |
第三章 :EDSV纤突蛋白Knob-S真核表达 | 第36-48页 |
1 材料与方法 | 第36-42页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-42页 |
2 结果 | 第42-47页 |
·EDSV纤突蛋白Knob-S基因扩增 | 第42-43页 |
·重组转移载体的构建及PCR和酶切鉴定 | 第43-44页 |
·重组穿梭载体的构建及鉴定 | 第44页 |
·重组杆状病毒的制备 | 第44-45页 |
·重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第45页 |
·重组杆状病毒滴度的测定 | 第45-46页 |
·重组蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第46页 |
·重组蛋白Western-blot鉴定 | 第46页 |
·间接免疫荧光检测 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
第四章 :原核表达CHIL-2和CHIL-18蛋白 | 第48-57页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·材料 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-51页 |
2 结果 | 第51-55页 |
·鸡白介素基因片段扩增 | 第51-52页 |
·重组pMD18-T-IL-2和pMD18-T-IL-18的PCR和酶切鉴定 | 第52-53页 |
·鸡IL-2和IL-18测序分析 | 第53页 |
·重组pET-32(a)-IL-2和pET-32(a)-IL-18的PCR扩增和酶切鉴定 | 第53页 |
·重组蛋白表达分析 | 第53-54页 |
·诱导时间的优化 | 第54页 |
·IPTG诱导浓度的优化 | 第54-55页 |
·纯化蛋白的分析 | 第55页 |
3、讨论 | 第55-57页 |
第五章 :EDSV Knob-S蛋白免疫原性分析及IL-2和IL-18佐剂效应评价 | 第57-64页 |
1 材料 | 第57-58页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57-58页 |
·试验动物 | 第58页 |
2 方法 | 第58-59页 |
·抗原的准备 | 第58页 |
·疫苗的制备 | 第58页 |
·实验动物分组及免疫 | 第58-59页 |
·HI检测抗体水平 | 第59页 |
3 结果 | 第59-61页 |
·血清中HI抗体的检测 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
5 全文总结 | 第62-64页 |
·原核和真核表达系统 | 第62页 |
·IL-2和IL-18的佐剂效应 | 第62-63页 |
·免疫原性 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-80页 |
英文缩略词表 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简介 | 第82页 |