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农杆菌介导的大丽轮枝菌的遗传转化

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 前言第8-17页
   ·棉花黄萎病概述第8页
   ·棉花黄萎病菌研究进展第8-11页
     ·棉花黄萎病菌的鉴定及形态学特征第8-9页
     ·棉花黄萎病表现症状及发生特点第9-10页
     ·棉花黄萎病菌致病机理研究第10-11页
   ·棉花黄萎病生物防治的研究第11-13页
     ·棉花黄萎病菌拮抗微生物研究现状第11-12页
     ·抗棉花黄萎病基因的研究现状第12-13页
   ·根癌农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. ATMT)第13-17页
     ·农杆菌介导真菌遗传转化的研究进展第13-14页
     ·农杆菌介导真菌遗传转化的机理第14-15页
     ·基因捕捉和激活标签在T-DNA 和转座子插入突变库构建中的应用第15-17页
2 材料与方法第17-24页
   ·试验材料第17页
   ·主要供试试剂及缓冲液第17页
   ·培养基第17-18页
   ·菌株的复壮第18页
   ·农杆菌菌株的验证第18-19页
     ·碱裂解法提取质粒第18页
     ·质粒PCR 检测第18-19页
   ·ATMT 转化条件的摸索第19-20页
     ·抗生素对供试菌株的影响测定第19-20页
     ·共培养时间对转化效率的影响第20页
     ·不同共培养方式及分生孢子状态对转化率的影响第20页
   ·转化与筛选第20-21页
   ·T-DNA 插入的分子检测及稳定性分析第21-22页
     ·转化子基因组DNA 的提取第21页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第21-22页
     ·转化子PCR 验证第22页
   ·转化子的生物学研究第22-23页
     ·转化子的菌落形态观察第22页
     ·转化子生长速度的测定第22页
     ·转化子的显微观察第22-23页
     ·转化子产孢能力的测试第23页
   ·转化子致病性鉴定第23-24页
     ·棉种处理第23页
     ·棉苗的种植和培育第23页
     ·棉苗的接种及病害的调查第23-24页
3 结果与分析第24-30页
   ·农杆菌菌株的验证第24页
   ·转化条件的摸索第24-27页
     ·头孢噻肟钠、羧卞青霉素对农杆菌生长抑制作用第24-25页
     ·潮霉素B 对大丽轮枝菌分生孢子萌发和菌落生长的作用第25页
     ·不同共培养方式对转化效率的影响第25-27页
   ·T-DNA 插入的分子鉴定第27-28页
     ·转化子的PCR 验证第27-28页
     ·转化子稳定性检测第28页
   ·转化子的生物学研究第28-30页
     ·大丽轮枝菌转化子的形态学观察与分析第28-29页
     ·致病相关转化子的筛选结果第29-30页
4 讨论第30-33页
   ·关于农杆菌介导的遗传转化体系第30-31页
   ·关于不同转化体系的探讨第31页
   ·关于出现假阳性转化子现象的探讨第31页
   ·关于致病相关突变体的筛选第31-32页
   ·下一步工作的设想与展望第32-33页
5 结论第33-34页
参考文献第34-39页
硕士期间发表论文第39-40页
作者简历第40-41页
致谢第41页

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