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漳州水仙随体单染色体文库的构建及其AFLP标记的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 引言第12-28页
 1 中国水仙研究概况第12-13页
 2 染色体微分离、微切割与微克隆技术的研究进展第13-21页
   ·染色体微分离、微克隆的发展第13-14页
   ·染色体微切割、微分离、微克隆技术流程第14-19页
     ·用于微分离和微切割的实验材料选择第14-15页
     ·染色体标本的制作第15页
     ·目标染色体的辨认第15-16页
     ·显微切割与分离第16页
     ·微克隆第16-17页
     ·微克隆的鉴定第17-18页
     ·染色体微克隆文库分析第18-19页
   ·植物染色体显微切割技术的应用第19-21页
     ·建立单条染色体高密度分子标记连锁图谱第19页
     ·基因组物理作图第19-20页
     ·分离重要基因第20页
     ·染色体进化研究第20页
     ·染色体的原位杂交或染色体涂染技术第20-21页
 3 AFLP 分子标记基本原理及其在观赏植物中应用研究进展第21-25页
   ·AFLP 技术的基本原理和流程第21-22页
     ·AFLP 的基本原理第21页
     ·AFLP 的技术流程第21页
     ·改良的AFLP第21-22页
   ·AFLP 的优缺点第22页
     ·AFLP 的优点第22页
     ·AFLP 的缺点第22页
   ·AFLP 技术在观赏植物应用中的研究第22-25页
     ·遗传多样性和亲缘关系研究第22-23页
     ·品种鉴定和种子资源鉴定第23-24页
     ·基因定位与克隆第24页
     ·遗传连锁图谱的构建第24-25页
     ·标记辅助选择育种第25页
 4 问题与展望第25-27页
 5 本研究的内容及意义第27-28页
   ·研究内容及意义第27页
   ·技术路线第27-28页
第二章 漳州水仙单染色体微分离、微扩增第28-36页
 1 材料与方法第28-30页
   ·实验材料第28页
   ·实验方法第28-30页
     ·材料的处理第28页
     ·染色体标本制备第28页
     ·染色体微分离第28-29页
     ·单染色体的体外扩增第29-30页
   ·琼脂糖凝胶电泳第30页
 2 结果与分析第30-33页
   ·材料的预处理和固定第30-31页
   ·染色体制片第31页
   ·染色体观察及目标染色体的确定第31-32页
   ·漳州水仙染色体微分离第32-33页
   ·染色体体外扩增第33页
 3 讨论第33-36页
第三章 漳州水仙单染色体扩增产物的鉴定第36-42页
 1 材料与方法第36-39页
   ·实验材料第36页
   ·实验方法第36-39页
     ·水仙基因组DNA 提取第36页
     ·DNA 浓度与质量分析第36页
     ·水仙基因组DNA 的酶切及纯化第36页
     ·Southern 转膜第36-37页
     ·标记探针第37-38页
     ·估计探针效率第38页
     ·预杂交第38页
     ·杂交第38-39页
     ·显色反应第39页
     ·保存第39页
 2 结果与分析第39-41页
   ·水仙基因组DNA 提取及酶切结果第39-40页
   ·Southern 杂交分析第40-41页
 3 讨论第41-42页
第四章 漳州水仙随体单染色体的微克隆与DNA 文库的建立第42-47页
 1 材料与方法第42-44页
   ·实验材料第42页
   ·实验方法第42-44页
     ·漳州水仙单染色体PCR 扩增产物的纯化第42页
     ·PCR 产物与载体连接第42页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第42-43页
     ·连接产物的转化第43-44页
     ·PCR 检测第44页
     ·琼脂糖凝胶电泳第44页
     ·质粒提取第44页
     ·质粒酶切第44页
 2 结果与分析第44-46页
   ·PCR 检测结果第44-45页
   ·染色体DNA 文库分析第45-46页
 3 讨论第46-47页
第五章 漳州水仙单染色体AFLP 标记的建立及分析第47-54页
 1 材料与方法第47-50页
   ·实验材料第47页
   ·方法第47-50页
     ·预扩增第47-48页
     ·选择性扩增第48页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶的制备及其电泳第48-49页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的凝胶银染程序第49-50页
 2 结果与分析第50-53页
   ·酶切及预扩增结果第50-51页
   ·选择性扩增第51-52页
   ·两染色体的AFLP 分析第52-53页
 3 讨论第53-54页
小结第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62页

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