摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 研究背景 | 第12-18页 |
1 双生病毒的分类 | 第12-15页 |
·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第13页 |
·甜菜曲顶病毒属(Curtovirus) | 第13页 |
·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第13页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第13-15页 |
2 双生病毒伴随的类似 Nanovirus 的 DNA1 分子 | 第15页 |
3 双生病毒伴随新型的卫星分子—DNA-β | 第15-16页 |
4 双生病毒的危害 | 第16页 |
5 双生病毒侵染性克隆的构建及其应用 | 第16-17页 |
6 立题依据 | 第17-18页 |
第二章 实验材料与方法 | 第18-24页 |
1 材料 | 第18页 |
·毒源 | 第18页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·常用缓冲液及抗生素的配制(见附录A) | 第18页 |
2 方法 | 第18-24页 |
·植物总DNA 提取(CTAB 法) | 第18-19页 |
·PCR | 第19-20页 |
·PCR 产物纯化 | 第20页 |
·DNA 克隆技术 | 第20-22页 |
·重组质粒转入农杆菌 | 第22-23页 |
·Southern 印迹检测 | 第23页 |
·DNA 序列测定及分析 | 第23-24页 |
第三章 侵染野葛的双生病毒鉴定 | 第24-34页 |
1 材料和方法 | 第24-26页 |
·毒源 | 第24页 |
·植物总DNA 的提取 | 第24-25页 |
·PCR 扩增、克隆和序列测定 | 第25页 |
·序列分析 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-32页 |
·病毒分离物的分子检测 | 第26-27页 |
·Yg3 是野葛花叶病毒的一个分离物 | 第27-30页 |
·Yg3 病毒基因组结构 | 第30-32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
第四章 野葛花叶病毒致病性研究 | 第34-44页 |
1 材料与方法 | 第34-37页 |
·材料 | 第34页 |
·构建侵染性克隆所用引物(表4.1) | 第34-35页 |
·侵染性克隆的构建(图4.1) | 第35页 |
·侵染性克隆的转化 | 第35页 |
·农杆菌接种 | 第35页 |
·接种后 KuMV-Yg3 的 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
·病毒DNA 的Southern 印迹检测 | 第36-37页 |
2 实验结果 | 第37-42页 |
·KuMV-Yg3 病毒分离物 DNA-A 及 DNA-B 侵染性克隆的构建 | 第37-40页 |
·KuMV-Y93 DNA-A 及DNA-B 致病性测定 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
第五章 胜红蓟黄脉病毒及其伴随卫星分子致病性研究 | 第44-57页 |
1 材料与方法 | 第44-49页 |
·材料 | 第44页 |
·构建侵染性克隆所用引物(表5.1) | 第44-45页 |
·构建AYVV-F2 DNA-A、DNA-β及ΔDNA-β侵染性克隆(图5.1) | 第45页 |
·侵染性克隆的转化 | 第45页 |
·农杆菌接种 | 第45页 |
·接种后AYVV-F2 DNA-A、DNA-β及ΔDNA-β的PCR 鉴定 | 第45-49页 |
2 实验结果 | 第49-55页 |
·AYVV-F2 DNA-A、DNA-β及ΔDNA-β侵染性克隆的构建 | 第49-53页 |
·AYVV-F2 DNA-A、DNA-β及ΔDNA-β的致病性测定 | 第53-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
全文小结 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录 A 常用缓冲液及培养基配方 | 第64-67页 |
附录 B 本文所用载体图谱 | 第67-68页 |
附录 C 本文所用核酸分子量标准 Lambda DNA-EcoR I+Hind III (A) 及 150bp DNA Ladder Marker (B) | 第68-69页 |
附录 D 本文所用术语缩写及中英文对照 | 第69-70页 |
附录 E 硕士期间发表相关文章 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |