| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1 全球两栖动物保护现状 | 第11-12页 |
| 2 微卫星分子标记 | 第12-15页 |
| ·微卫星分子标记简介 | 第13-14页 |
| ·微卫星标记作为遗传标记的优点 | 第14-15页 |
| ·微卫星标记作为遗传标记的缺点 | 第15页 |
| 3 微卫星位点的获得 | 第15-22页 |
| ·微卫星位点获得途径 | 第16-20页 |
| ·从已经公布的序列中(尤其是EST文库)筛查微卫星DNA | 第16页 |
| ·利用近缘种之间引物的通用性得到目的物种的微卫星标记 | 第16-17页 |
| ·经典法 | 第17-18页 |
| ·省略筛库法 | 第18-19页 |
| ·构建微卫星富集文库筛选微卫星标记 | 第19-20页 |
| ·无尾两栖动物的微卫星筛选 | 第20-22页 |
| 4 微卫星在蛙类种群遗传研究中的应用综述 | 第22-27页 |
| ·自然选择或遗传漂变 | 第22-23页 |
| ·种群动态研究 | 第23-24页 |
| ·景观和基因流阻隔 | 第24-25页 |
| ·有效种群数量的估计 | 第25-26页 |
| ·研究种群扩散的路径 | 第26页 |
| ·微卫星和蛙类行为研究 | 第26-27页 |
| 5 棘胸蛙研究进展 | 第27-29页 |
| 第二章 研究方法 | 第29-42页 |
| 1 棘胸蛙微卫星位点的筛选 | 第29-37页 |
| ·材料准备 | 第29-31页 |
| ·药品和酶 | 第29页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第29页 |
| ·样本DNA提取 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制各及转化效率的测定 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-37页 |
| ·酶切基因组DNA、连接衔接头以及片段选择 | 第31-33页 |
| ·磁珠富集法捕获SSR序列 | 第33-34页 |
| ·双链恢复PCR反应 | 第34页 |
| ·克隆转化、蓝白斑筛选和测序 | 第34-35页 |
| ·SSR序列获得、引物设计及多态性引物的初步筛检 | 第35-36页 |
| ·基因分型，多态性信息获得 | 第36页 |
| ·SSR位点评估测定 | 第36-37页 |
| 2 棘胸蛙种群遗传分析 | 第37-42页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·采样信息 | 第37-38页 |
| ·引物信息 | 第38-39页 |
| ·分析软件 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·DNA提取 | 第39-40页 |
| ·PCR反应及电泳分析 | 第40页 |
| ·数据分析 | 第40-42页 |
| 第三章 结果和分析 | 第42-55页 |
| 1 微卫星位点筛选结果 | 第42-46页 |
| ·SSR序列富集效率统计结果 | 第42页 |
| ·微卫星位点的特征分析 | 第42-46页 |
| 2 种群遗传分析结果 | 第46-55页 |
| ·遗传多样性和哈迪温伯格平衡 | 第46-48页 |
| ·种群遗传结构和基因流 | 第48-53页 |
| ·瓶颈效应 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-63页 |
| 1 探针的选择 | 第55-56页 |
| 2 等位基因检测误差 | 第56页 |
| 3 遗传结构和种群动态分析 | 第56-58页 |
| 4 棘胸蛙隐种的进一步确认 | 第58-60页 |
| 5 棘胸蛙优先保护种群的确定 | 第60-63页 |
| 第五章 小结和展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-78页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |