| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·立题背景 | 第11-12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-21页 |
| ·E.coli检测技术的研究进展 | 第12-16页 |
| ·大肠杆菌中高价铁肠杆菌素受体蛋白FepA的概述 | 第16-19页 |
| ·高价铁肠杆菌素受体蛋白FepA在免疫学中的研究进展 | 第19-21页 |
| ·研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-35页 |
| ·材料与设备 | 第22-26页 |
| ·质粒和菌株 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·酶与试剂盒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·缓冲液与储备液 | 第24-26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·大肠杆菌基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·特异性引物设计 | 第27页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第28-29页 |
| ·目的片段的亚克隆、转化及质粒提取 | 第29-30页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第30-34页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3 结果分析 | 第35-45页 |
| ·目的片段PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·目的片段的PCR扩增结果 | 第35页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第35-36页 |
| ·目的片段的T-A克隆 | 第36-39页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-39页 |
| ·重组质粒的测序 | 第39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-43页 |
| ·原核表达载体的双酶切 | 第39-40页 |
| ·酶切后条带的胶回收 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-43页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达的初步研究 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白表达形式的鉴定 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·目的基因的克隆 | 第45页 |
| ·表面抗原决定簇基因的选择 | 第45-46页 |
| ·T-A克隆方法的应用 | 第46页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第46页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及鉴定 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录:扩增片段的测序结果及同源性比较 | 第55-59页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第59页 |