| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 金属硫蛋白简介及其研究现状 | 第13-20页 |
| ·金属硫蛋白简介 | 第13-15页 |
| ·金属硫蛋白的理化性质 | 第13页 |
| ·金属硫蛋白的结构 | 第13-14页 |
| ·金属硫蛋白的分类 | 第14-15页 |
| ·金属硫蛋白的功能 | 第15-18页 |
| ·参与微量元素的代谢 | 第15页 |
| ·拮抗电离辐射，清除自由基 | 第15-16页 |
| ·参与重金属解毒作用 | 第16-17页 |
| ·参与激素和免疫调节 | 第17页 |
| ·金属硫蛋白与疾病 | 第17-18页 |
| ·金属硫蛋白的应用 | 第18-19页 |
| ·生物工程 | 第18-19页 |
| ·环境监测 | 第19页 |
| ·疾病防治与营养保健 | 第19页 |
| ·海洋贝类金属硫蛋白的研究进展 | 第19-20页 |
| 2 大珠母贝简介及其研究现状 | 第20-22页 |
| ·大珠母贝简介 | 第20-21页 |
| ·大珠母贝研究现状 | 第21-22页 |
| ·国内研究现状 | 第21页 |
| ·国外研究现状 | 第21-22页 |
| 3 研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 大珠母贝金属硫蛋白cDNA序列克隆与分析 | 第24-41页 |
| 1 材料与方法 | 第25-31页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·总 RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第27页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·电泳检测 | 第28页 |
| ·纯化大片段 SMART cDNA | 第28页 |
| ·SMART cDNA和载体连接 | 第28页 |
| ·高效感受态的制备和连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·高效感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·克隆的筛选与测序 | 第29-30页 |
| ·序列统计和同源性分析 | 第30页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白cDNA序列特征分析 | 第30-31页 |
| 2 结果 | 第31-38页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第31-32页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白序列特征分析 | 第32-38页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白cDNA全长序列特征 | 第32页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白氨基酸序列分析 | 第32页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白的分子进化 | 第32-38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| ·全长cDNA文库构建 | 第38页 |
| ·序列特征分析 | 第38-41页 |
| 第三章 大珠母贝金属硫蛋白的表达研究 | 第41-55页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| ·材料来源 | 第42页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白原核表达 | 第42页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白在镉离子诱导下的表达 | 第42页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第42-43页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白原核表达 | 第42页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白在镉离子诱导下的表达 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42-43页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白原核表达 | 第42-43页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白在镉离子诱导下的表达 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白的原核表达 | 第43-45页 |
| ·RNA的提取和cDNA的合成 | 第43页 |
| ·引物设计 | 第43页 |
| ·表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·诱导表达 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)鉴定 | 第44-45页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白在镉离子刺激下的表达研究 | 第45-48页 |
| ·大珠母贝苗的暂养 | 第45页 |
| ·镉离子诱导实验 | 第45-46页 |
| ·大珠母贝总 RNA的提取 | 第46页 |
| ·大珠母贝cDNA第一链的合成 | 第46页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR反应条件的优化 | 第47页 |
| ·cDNA模板量的调平 | 第47-48页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白表达量的检测 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-52页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白的原核表达 | 第48-49页 |
| ·镉离子对大珠母贝苗的刺激实验 | 第49页 |
| ·最佳 RT-PCR条件的优化 | 第49页 |
| ·镉离子刺激下大珠母贝金属硫蛋白表达的半定量分析 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| ·镉离子对大珠母贝苗种的刺激 | 第52页 |
| ·大珠母贝金属硫蛋白在镉离子诱导下的表达规律 | 第52-55页 |
| 第四章 小结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 (硕士期间发表的文章和参加的会议) | 第65页 |