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玉米蛋白激酶基因ZmPto1的克隆及功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 文献综述第10-22页
   ·基因对基因学说第10页
   ·番茄细菌性斑点病第10-11页
   ·Pto位点的发现历史第11-12页
   ·Pto基因及其信号传导途径第12-19页
     ·Pto基因的分离第12-13页
     ·Pto蛋白序列的特点第13-14页
     ·无毒蛋白基因avrPto的分离第14-15页
     ·Pto的信号传导途径主要成员的作用第15-19页
   ·玉米中Pto信号途径的研究进展第19页
   ·酵母双杂交系统第19-21页
     ·酵母双杂交系统的研究历史第19-20页
     ·酵母双杂交系统特点与优点第20页
     ·酵母双杂交系统在Pto信号调控通路研究中的应用第20-21页
   ·本实验的目的和意义第21-22页
2 材料和方法第22-32页
   ·试验材料和试剂第22页
     ·材料第22页
     ·主要分子生物学试剂第22页
   ·试验方法第22-32页
     ·玉米幼苗的培养及处理第22-23页
     ·玉米总RNA的提取第23-24页
     ·RT-PCR扩增玉米ZmPtol基因第24-27页
     ·酵母双杂交实验第27-29页
     ·ZmPtol基因的表达分析第29-30页
     ·拟南芥的ZmPtol基因转化及鉴定第30-32页
3 结果与分析第32-46页
   ·ZmPtol基因的克隆与序列分析第32-37页
     ·玉米叶片中总RNA的提取第32-33页
     ·ZmPtol的RT-PCR第33-34页
     ·PCR产物的pGEM-T-easy载体连接及验证第34-35页
     ·ZmPtol蛋白序列的分析第35页
     ·ZmPtol蛋白序列与相关序列的比对及进化树分析第35-37页
   ·ZmPtol基因的表达分析第37-39页
   ·ZmPtol的转基因拟南芥植株的获得第39-41页
     ·植物表达载体的构建第39-40页
     ·拟南芥转化植株的筛选第40页
     ·拟南芥转基因植株的分子检测第40-41页
   ·ZmPtol与ZmPtil相互作用第41-43页
     ·EG202-ZmPtol载体构建第41-42页
     ·JG4-5-ZmPtil载体构建第42页
     ·酵母双杂交结果第42-43页
   ·ZmPtol与ZmPtil-1相互作用第43-46页
     ·JG4-5-ZmPtil-1载体的构建第43-44页
     ·酵母双杂交结果第44-46页
4 讨论第46-49页
   ·逆境处理在基因克隆方法中的应用第46页
   ·ZmPtol在不同组织中转录水平表达分析第46-47页
   ·ZmPtol的氨基酸序列保守位点和功能的关系第47页
   ·酵母双杂交方法的选择第47页
   ·ZmPtol在玉米信号传导通路中的角色第47-48页
   ·本实验的创新点第48页
   ·实验展望第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-56页
附录第56-63页

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