| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-14页 |
| 英文缩略词对照表 | 第14-16页 |
| 1 绪论 | 第16-40页 |
| 1.1 问题的提出及研究意义 | 第16-17页 |
| 1.2 国内外现状研究 | 第17-35页 |
| 1.2.1 衰老相关疾病的危害 | 第17-19页 |
| 1.2.2 皮肤光老化的危害及诱因 | 第19-22页 |
| 1.2.3 Bach2 在衰老调控中的重要 | 第22-27页 |
| 1.2.4 自噬在细胞衰老中的作用 | 第27-33页 |
| 1.2.5 Bach2 调控自噬发生 | 第33-35页 |
| 1.3 课题的研究目的与意义 | 第35-40页 |
| 1.3.1 研究目的： | 第35页 |
| 1.3.2 课题研究内容 | 第35-37页 |
| 1.3.3 课题研究技术路线 | 第37-38页 |
| 1.3.4 课题的特色及创新点 | 第38-40页 |
| 2 UVA诱导细胞光老化模型的构建及鉴定 | 第40-66页 |
| 2.1 引言 | 第40-41页 |
| 2.2 实验材料与仪器设备 | 第41-47页 |
| 2.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第41-43页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第43-46页 |
| 2.2.3 主要实验试剂配制 | 第46-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-55页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.3.2 成纤维细胞光老化模型构建 | 第48页 |
| 2.3.3 SA-β-gal染色 | 第48页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR | 第48-51页 |
| 2.3.5 免疫印迹 | 第51-53页 |
| 2.3.6 免疫组化 | 第53-54页 |
| 2.3.7 免疫荧光 | 第54-55页 |
| 2.4 数据统计分析 | 第55页 |
| 2.5 实验结果 | 第55-62页 |
| 2.5.1 Meta分析鉴定对光损伤的相关基因 | 第55-57页 |
| 2.5.2 UVA慢性照射诱导原代成纤维细胞光老化 | 第57-62页 |
| 2.6 分析与讨论 | 第62-64页 |
| 2.7 小结 | 第64-66页 |
| 3 Bach2 参与调控成纤维细胞光老化发生 | 第66-80页 |
| 3.1 引言 | 第66页 |
| 3.2 主要实验材料与仪器设备 | 第66-67页 |
| 3.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第66-67页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第67页 |
| 3.3 实验方法 | 第67-71页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第67页 |
| 3.3.2 Bach2 超表达质粒构建 | 第67-69页 |
| 3.3.3 质粒转染 | 第69-70页 |
| 3.3.4 SA-β-gal染色 | 第70页 |
| 3.3.5 实时荧光定量PCR | 第70页 |
| 3.3.6 免疫印迹 | 第70-71页 |
| 3.4 实验结果 | 第71-77页 |
| 3.4.1 Bach2 下调后促进成纤维细胞的衰老发生 | 第71-72页 |
| 3.4.2 Bach2 下调后增加UVA介导的成纤维细胞光老化 | 第72-73页 |
| 3.4.3 Bach2 过表达后抑制HDF成纤维细胞光老化 | 第73-74页 |
| 3.4.4 Bach2 抑制UVA介导的成纤维细胞的光老化 | 第74-76页 |
| 3.4.5 Bach2 的调控依赖于DNA损伤反应激酶ATM及 ATR | 第76-77页 |
| 3.5 分析与讨论 | 第77页 |
| 3.6 小结 | 第77-80页 |
| 4 Bach2 通过细胞自噬调节成纤维细胞衰老 | 第80-96页 |
| 4.1 引言 | 第80页 |
| 4.2 主要实验材料与仪器设备 | 第80-81页 |
| 4.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第80-81页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第81页 |
| 4.3 实验方法 | 第81-83页 |
| 4.3.1 细胞核质分离 | 第81-82页 |
| 4.3.2 免疫共沉淀 | 第82-83页 |
| 4.4 实验结果 | 第83-92页 |
| 4.4.1 Bach2 过表达后主要定位于成纤维细胞的细胞质中 | 第83-84页 |
| 4.4.2 Bach2 过表达促进成纤维细胞自噬发生 | 第84-86页 |
| 4.4.3 Bach2 下调后抑制成纤维细胞自噬相关基因及蛋白的表达 | 第86-87页 |
| 4.4.4 自噬抑制成纤维细胞衰老相关 | 第87-91页 |
| 4.4.5 Bach2 参与调控成纤维细胞自噬的作用机制 | 第91-92页 |
| 4.5 分析与讨论 | 第92-94页 |
| 4.6 小结 | 第94-96页 |
| 5 Bach2在UVA诱导的光老化小鼠皮肤中的作用 | 第96-104页 |
| 5.1 引言 | 第96页 |
| 5.2 主要实验材料和仪器设备 | 第96-97页 |
| 5.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第96-97页 |
| 5.2.2 主要实验试剂 | 第97页 |
| 5.3 实验方法 | 第97-98页 |
| 5.3.1 组织免疫荧光 | 第97-98页 |
| 5.3.2 免疫印迹 | 第98页 |
| 5.4 实验结果 | 第98-102页 |
| 5.4.1 UVA诱导小鼠皮肤光老化的鉴定 | 第98-100页 |
| 5.4.2 Bach2在UVA介导的衰老小鼠皮肤中表达降低 | 第100-102页 |
| 5.5 分析与讨论 | 第102页 |
| 5.6 小结 | 第102-104页 |
| 6 光动力治疗通过Bach2 调控UVA介导的成纤维细胞的光老化 | 第104-114页 |
| 6.1 引言 | 第104-105页 |
| 6.2 主要实验材料和仪器设备 | 第105页 |
| 6.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第105页 |
| 6.2.2 主要实验试剂 | 第105页 |
| 6.3 实验方法 | 第105-106页 |
| 6.3.1 细胞培养 | 第105页 |
| 6.3.2 成纤维细胞光老化模型构建 | 第105-106页 |
| 6.3.3 SA-β-gal染色 | 第106页 |
| 6.3.4 实时荧光定量PCR | 第106页 |
| 6.3.5 免疫印迹 | 第106页 |
| 6.3.6 组织免疫荧光 | 第106页 |
| 6.3.7 红光照射参数设置 | 第106页 |
| 6.3.8 PDT处理光老化的成纤维细胞 | 第106页 |
| 6.3.9 PDT处理光老化的小鼠 | 第106页 |
| 6.4 实验结果 | 第106-112页 |
| 6.4.1 PDT(0-5.0 mM)降低UVA介导的光老化 | 第106-107页 |
| 6.4.2 PDT(0-1.0 mM)处理增加Bach2 的表达 | 第107-110页 |
| 6.4.2.1 0mM ALA-PDT降低Bach2 下调引起的成纤维细胞的衰老 | 第108-110页 |
| 6.4.3 Bach2在PDT处理的光老化小鼠皮肤中表达上调 | 第110-112页 |
| 6.5 分析与讨论 | 第112-113页 |
| 6.6 小结 | 第113-114页 |
| 7 结论与展望 | 第114-118页 |
| 7.1 主要结论 | 第114-115页 |
| 7.1.1 Bach2 参与UVA介导的皮肤成纤维细胞光老化 | 第114页 |
| 7.1.2 Bach2 在皮肤成纤维细胞中且具有抵抗UVA引起的光老化 | 第114页 |
| 7.1.3 Bach2 与自噬相关蛋白相互作用介导自噬的发生,抑制成纤维细胞衰老 | 第114-115页 |
| 7.1.4 Bach2 在光老化小鼠皮肤组织中表达减少 | 第115页 |
| 7.1.5 PDT通过Bach2 调控成纤维细胞光老化 | 第115页 |
| 7.2 后续工作展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-138页 |
| 附录 | 第138-142页 |
| A 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第138-139页 |
| B 作者在攻读学位期间发表的会议论文目录 | 第139页 |
| C 作者在攻读学位期间参加科研项目目录 | 第139-140页 |
| D 学位论文数据集 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142-144页 |
