| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-4页 |
| 目录 | 第4-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-22页 |
| 1 植物内生菌概况 | 第7-8页 |
| ·植物内生菌的定义及多样性 | 第7页 |
| ·植物内生菌的起源和演化 | 第7-8页 |
| 2 植物内生菌的作用 | 第8-10页 |
| ·固氮作用 | 第8页 |
| ·促进植物生长、发育 | 第8页 |
| ·增强宿主植物的抗逆性 | 第8-9页 |
| ·提高宿主植物对生物胁迫的抗性 | 第8-9页 |
| ·增强宿主对非生物胁迫的抗性 | 第9页 |
| ·产生或促进宿主产生一些抗人类疾病的药物 | 第9-10页 |
| 3 内生菌宿主植物的选择 | 第10-11页 |
| 4 植物内生菌中获得的抗肿瘤活性物质 | 第11-13页 |
| ·萜类抗肿瘤化合物 | 第11页 |
| ·生物碱类抗肿瘤化合物 | 第11-13页 |
| ·苯丙素类抗肿瘤化合物 | 第13页 |
| ·甾体类抗肿瘤化合物 | 第13页 |
| 5 抗肿瘤药物筛选模型的研究进展 | 第13-20页 |
| ·分子水平的抗肿瘤药物筛选模型 | 第13-15页 |
| ·肿瘤血管生成抑制剂(TAI)高通量筛选 | 第13-14页 |
| ·端粒酶抑制剂的筛选模型 | 第14-15页 |
| ·微管蛋白为靶点的抗肿瘤药物筛选 | 第15页 |
| ·细胞水平的抗肿瘤药物筛选模型 | 第15-17页 |
| ·MTT法检测细胞增殖的抗肿痛药物筛选 | 第15页 |
| ·差异性DNA修复模型 | 第15-16页 |
| ·血管内皮细胞模型以及内皮细胞和肿瘤细胞共培养模型 | 第16-17页 |
| ·器官及个体水平的抗肿瘤药物筛选模型 | 第17-20页 |
| ·自发、诱发小鼠肿瘤模型的建立 | 第17页 |
| ·移植小鼠肿瘤模型的建立 | 第17-18页 |
| ·转基因小鼠肿瘤模型的建立 | 第18页 |
| ·体内血管生成模型 | 第18-19页 |
| ·斑马鱼在抗血管生成药物筛选中的应用 | 第19-20页 |
| 6 立题依据 | 第20页 |
| 7 实验方案 | 第20-22页 |
| 第二章 植物内生真菌活性菌株的筛选 | 第22-33页 |
| 1 试验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·主要培养基 | 第23-24页 |
| ·肿痛细胞株 | 第24页 |
| ·抗菌模型指示菌株 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-26页 |
| ·筛选样品的制备 | 第24-25页 |
| ·菌种的纯化与复壮 | 第24页 |
| ·筛选样品的制备 | 第24-25页 |
| ·菌株发酵样品的筛选模型 | 第25-26页 |
| ·抗肿瘤细胞筛选模型 | 第25-26页 |
| ·抗菌筛选模型 | 第26页 |
| 3 试验结果 | 第26-31页 |
| ·筛选样品制备结果 | 第26-27页 |
| ·活性菌株的初筛 | 第27-29页 |
| ·抗肿瘤细胞模型活性菌株初筛结果 | 第27页 |
| ·抗菌模型活性菌株初筛结果 | 第27-29页 |
| ·抗肿瘤细胞模型活性菌株复筛结果 | 第29-31页 |
| 4 本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 活性菌株CPCC480435的分类鉴定 | 第33-42页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·斜面培养基 | 第33页 |
| ·发酵培养基 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·仪器设备 | 第34页 |
| 2 试验方法 | 第34-37页 |
| ·菌株CPCC480435的形态学鉴定 | 第34-35页 |
| ·菌株形态特征的变化 | 第34页 |
| ·菌株培养特征的变化 | 第34-35页 |
| ·菌株CPCC480435的分子鉴定 | 第35-37页 |
| ·染色体DNA的提取: | 第35页 |
| ·PCR扩增引物的合成 | 第35-36页 |
| ·18S rDNA和ITS序列PCR扩增体系 | 第36页 |
| ·PCR扩增条件 | 第36-37页 |
| ·系统发育分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-41页 |
| ·菌株的形态、培养特征 | 第37-39页 |
| ·CPCC480435染色体DNA的制备及18S rDNA和ITS序列的PCR | 第39-40页 |
| ·菌株CPCC480435的系统发育分析及鉴定结果 | 第40-41页 |
| 4 小结与讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 内生真菌CPCC480435代谢产物的分离纯化、结构鉴定 | 第42-59页 |
| 1 试验材料 | 第42-43页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·主要培养基 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-48页 |
| ·发酵代谢产物的基本特性探索 | 第43-44页 |
| ·CPCC480435的二级发酵培养 | 第43页 |
| ·代谢产物活性的跟踪检测方法 | 第43-44页 |
| ·不同处理温度对菌株代谢产物活性的影响 | 第44页 |
| ·溶媒萃取试验 | 第44页 |
| ·薄层层析法(TLC)的探索 | 第44-45页 |
| ·展开体系的探索 | 第44页 |
| ·显色方法的探索 | 第44-45页 |
| ·产物组分的分离 | 第45-48页 |
| ·组分硅胶初步分离 | 第45-46页 |
| ·组份进一步纯化 | 第46页 |
| ·HSCCC的溶剂体系的选择 | 第46-48页 |
| ·样品的理化性质及化学结构解析 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-58页 |
| ·最佳发酵时间的确定 | 第48-49页 |
| ·不同处理温度对代谢产物活性稳定性的影响 | 第49-50页 |
| ·溶媒萃取试验结果 | 第50页 |
| ·TLC检测及柱层析条件的确定 | 第50-51页 |
| ·HSCCC分离 | 第51-53页 |
| ·菌株CPCC480435代谢产物的结构鉴定及活性研究 | 第53-58页 |
| ·化合物CPCC480435z1的结构鉴定 | 第53-55页 |
| ·化合物CPCC480435z1对肿瘤细胞的体外抑制活性 | 第55页 |
| ·化合物CPCC480435z2的结构鉴定 | 第55-56页 |
| ·化合物CPCC480435z3的结构签定 | 第56-58页 |
| 4 小结与讨论 | 第58-59页 |
| 全文总结 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65-77页 |
| 1、CPCC480435z1的相关图谱 | 第65-68页 |
| 2、CPCC480435z2的相关图谱 | 第68-72页 |
| 3、CPCC480435z3的相关图谱 | 第72-77页 |
