| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 重组药用蛋白的表达纯化研究进展 | 第13-24页 |
| ·重组药用蛋白的表达 | 第14-21页 |
| ·细菌内表达重组蛋白 | 第14-16页 |
| ·哺乳动物细胞培养表达重组蛋白 | 第16-17页 |
| ·植物生物反应器表达重组蛋白 | 第17-19页 |
| ·动物乳腺反应器表达重组蛋白 | 第19-21页 |
| ·重组药用蛋白的纯化 | 第21-24页 |
| ·样品准备与预处理 | 第21页 |
| ·层析技术 | 第21-22页 |
| ·其他方法 | 第22-24页 |
| 第二章 腺病毒及其载体研究进展 | 第24-35页 |
| ·腺病毒的生物学特性 | 第24-26页 |
| ·形态结构 | 第24页 |
| ·感染周期 | 第24-25页 |
| ·编码基因的转录与复制 | 第25-26页 |
| ·重组腺病毒载体的构建 | 第26-33页 |
| ·第一代腺病毒载体的构建 | 第28-31页 |
| ·第二代腺病毒载体构建 | 第31-33页 |
| ·第三代腺病毒载体构建 | 第33页 |
| ·腺病毒作为基因工程载体的优势 | 第33-35页 |
| ·宿主细胞种类多，安全性能相对好 | 第33页 |
| ·增殖能力强，表达谱广，外源基因表达水平高 | 第33-34页 |
| ·与人类基因同源，无插入致突变性 | 第34-35页 |
| 第三章 人抗凝血酶(hAT)研究进展 | 第35-46页 |
| ·hAT 的结构、功能与缺陷症 | 第35-42页 |
| ·hAT 的结构 | 第35-37页 |
| ·AT 的抗凝血功能 | 第37-38页 |
| ·AT 的其它生理功能 | 第38-41页 |
| ·AT 缺陷症 | 第41-42页 |
| ·rhAT 的表达与分离纯化研究进展 | 第42-44页 |
| ·hAT 基因表达研究进展 | 第42-44页 |
| ·AT 蛋白的分离纯化研究进展 | 第44页 |
| ·对AT 进一步研究的意义 | 第44-46页 |
| 第四章 hAT cDNA 序列的克隆及其表达载体构建 | 第46-61页 |
| ·材料与方法 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·hAT 全长cDNA 的扩增与序列分析 | 第54-56页 |
| ·hAT 表达载体及穿梭载体的构建 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| ·hAT 基因序列的分离、克隆 | 第57-58页 |
| ·hAT 表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第五章 细菌内同源重组获得重组腺病毒载体的研究 | 第61-69页 |
| ·材料和方法 | 第61-63页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-65页 |
| ·穿梭载体的线性化 | 第63页 |
| ·重组腺病毒载体的鉴定 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| ·重组腺病毒载体的构建方法 | 第65-66页 |
| ·细菌内同源重组法构建重组腺病毒载体的优势 | 第66-67页 |
| ·影响大质粒转化的因素 | 第67页 |
| ·二次转化提高细菌内同源重组的成功率 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第六章 rhAT 在体外培养的羊乳腺上皮细胞中的表达研究 | 第69-82页 |
| ·材料和方法 | 第69-76页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-78页 |
| ·重组腺病毒的包装 | 第76页 |
| ·重组腺病毒的扩增 | 第76页 |
| ·重组腺病毒的纯化和滴度测定 | 第76-77页 |
| ·重组腺病毒介导rhAT 在羊乳腺上皮细胞中的表达 | 第77-78页 |
| ·重组表达质粒p3AT 介导rhAT 在羊乳腺上皮细胞内的表达 | 第78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| ·腺病毒的生活周期 | 第78-79页 |
| ·影响腺病毒构建的主要因素 | 第79-81页 |
| ·腺病毒载体介导的rhAT 在乳腺上皮细胞中的表达 | 第81页 |
| ·表达质粒介导的rhAT 在乳腺上皮细胞中的表达 | 第81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第七章 rhAT 在山羊乳腺内的表达以及重组蛋白纯化研究 | 第82-91页 |
| ·材料和方法 | 第82-84页 |
| ·材料 | 第82-83页 |
| ·方法 | 第83-84页 |
| ·结果与分析 | 第84-86页 |
| ·羊乳腺感染病毒后rhAT 的表达 | 第84-86页 |
| ·羊乳中的rhAT 的活性分析 | 第86页 |
| ·羊乳中rhAT 的分离纯化 | 第86页 |
| ·讨论 | 第86-90页 |
| ·动物乳腺生物反应器表达重组蛋白的优势 | 第86-87页 |
| ·转基因动物乳腺生物反应器 | 第87-88页 |
| ·以腺病毒为载体构建非转基因动物乳腺生物反应器 | 第88-89页 |
| ·肝素琼脂糖凝胶亲和层析法分离rhAT | 第89-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 第八章 rhAT 对 DIC 大鼠模型的疗效研究 | 第91-101页 |
| ·材料与方法 | 第91-95页 |
| ·材料 | 第91-92页 |
| ·方法 | 第92-95页 |
| ·结果与分析 | 第95-97页 |
| ·动物模型的建立 | 第95页 |
| ·rhAT 对DIC 大鼠血浆中六项DIC 指标的作用效果 | 第95-96页 |
| ·大鼠对LPS 的抵抗作用观察 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-100页 |
| ·LPS 的建模机理 | 第97页 |
| ·大鼠对LPS 的抵抗作用 | 第97-98页 |
| ·rhAT 对DIC 大鼠的治疗作用 | 第98-100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 结论及创新点 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-115页 |
| 附录 | 第115-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 个人简介 | 第125页 |
