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干旱胁迫下小麦多胺含量的变化与microRNA的克隆

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-33页
   ·植物抗旱机理研究进展第12-14页
     ·渗透调节第12-13页
     ·信号传递与基因表达第13-14页
   ·植物内多胺的研究进展第14-18页
     ·多胺的结构与分类第14-15页
     ·多胺类化合物在植物组织中的分布第15页
     ·植物中多胺的生物合成与降解代谢第15-16页
     ·多胺与水分胁迫第16-18页
     ·植物组织中多胺的检测方法第18页
   ·MICRORNA研究进展第18-31页
     ·miRNA的发现第18-19页
     ·植物miRNA的特征第19-21页
     ·miRNA的基因组织形式第21-22页
     ·miRNA的生物产生第22-25页
     ·miRNA的作用机制第25-26页
     ·植物miRNA的功能第26-27页
     ·miRNA基因的发现方法第27-29页
     ·miRNA与植物的抗逆性第29-31页
   ·本研究的目的及意义第31-33页
第二章 反相高效液相色谱研究干旱胁迫下小麦幼苗中游离多胺含量的变化第33-43页
   ·实验材料与仪器第33页
     ·实验材料第33页
     ·实验仪器第33页
   ·实验方法第33-35页
     ·实验材料的处理与样品采集第33页
     ·游离态多胺的提取第33-34页
     ·待测样品的处理第34页
     ·多胺标准曲线的制作第34页
     ·色谱条件的优化第34页
     ·小麦中多胺含量的测定第34-35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·色谱条件的优化第35-37页
     ·线性范围第37页
     ·小麦根、叶中游离态多胺含量的变化第37-40页
   ·讨论第40-43页
第三章 干旱胁迫下小麦幼苗中MICRORNA的克隆第43-61页
   ·实验材料与试剂第43-46页
     ·植物材料第43页
     ·接头、引物、克隆载体及菌株第43页
     ·主要试剂及其配制第43-46页
   ·实验方法第46-55页
     ·总RNA提取第46-47页
     ·小RNA的富集第47页
     ·PAGE胶分离小RNA第47-48页
     ·从凝胶中回收小RNA第48页
     ·小RNA5′端磷酸基的去除第48-49页
     ·小RNA与3′接头连接第49页
     ·反转录第49-50页
     ·RNaseH消化杂合链中的RNA第50页
     ·cDNA3′加Poly(dG)第50页
     ·PCR 扩增第50-51页
     ·二次PCR第51页
     ·BanⅠ酶切第51-52页
     ·PCR产物的叠接与回收第52页
     ·用Taq酶为叠接产物加a第52页
     ·插入片段与pGEM-T Easy载体连接第52-53页
     ·电转化感受态细胞的制备第53页
     ·电转化第53页
     ·菌落PCR检测第53-54页
     ·选取阳性克隆送出测序第54页
     ·序列分析第54-55页
   ·结果与分析第55-58页
     ·总RNA的提取第55-56页
     ·15%变性PAGE分离小RNA第56-57页
     ·cDNA文库构建第57-58页
     ·菌落PCR筛选第58页
   ·讨论第58-61页
第四章 结论第61-62页
   ·游离多胺与小麦的抗旱性第61页
   ·干旱胁迫下小麦幼苗中MICRORNA的克隆第61-62页
参考文献第62-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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