| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-32页 |
| ·结核病简介 | 第13-17页 |
| ·结核病的现状 | 第13页 |
| ·结核杆菌概况 | 第13-15页 |
| ·结核分枝杆菌生活周期以及逃避巨噬细胞机制 | 第15-17页 |
| ·结核杆菌毒力因子 | 第17-19页 |
| ·ESAT6 | 第17-18页 |
| ·Ag85B | 第18-19页 |
| ·肺结核疫苗 | 第19-27页 |
| ·卡介苗 | 第19-21页 |
| ·结核疫苗新型基因工程疫苗 | 第21-26页 |
| ·临床疫苗动物模型 | 第26-27页 |
| ·疫苗的质量控制之传代稳定性 | 第27-28页 |
| ·tPA 信号肽在疫苗研究中的作用 | 第28-30页 |
| ·信号肽工作原理 | 第28-29页 |
| ·tPA 信号肽 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的，设计思路和方案 | 第30-32页 |
| ·研究目的 | 第30页 |
| ·设计思路及方案 | 第30-32页 |
| 第二章 MVA-Ag85B-ESAT6, AD-Ag85B-ESAT6 和 rBCG-Ag85B 的传代稳定性研究 | 第32-41页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·仪器 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·细胞菌种和毒株 | 第32页 |
| ·溶液配置 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·SDS-PAGE，Westernblot 检测蛋白表达 | 第34页 |
| ·PCR 方法扩增目的片段 | 第34-35页 |
| ·rBCG 的传代稳定性 | 第35页 |
| ·AD-Ag85B-ESAT6 的传代稳定性 | 第35-36页 |
| ·MVA-Ag85B-ESAT6 的传代稳定性 | 第36-37页 |
| ·实验结果 | 第37-40页 |
| ·rBCG 传代稳定性结果 | 第37页 |
| ·重组腺病毒传代稳定性检测结果 | 第37-38页 |
| ·重组痘病毒传代稳定性检测结果 | 第38-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 重组质粒构建以及真核表达检测 | 第41-53页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·常用试剂 | 第41页 |
| ·载体与质粒 | 第41页 |
| ·溶液配制 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-47页 |
| ·序列设计 | 第42-43页 |
| ·PCR 得到目的片段 | 第43-45页 |
| ·重组 pGEM-Teasy 克隆载体的构建 | 第45-46页 |
| ·重组 pcDNA3.1(-)和 pSC11M1 载体的构建 | 第46页 |
| ·质粒转染真核细胞以及检测方法 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-52页 |
| ·PCR 扩增目的片段结果 | 第47-48页 |
| ·重组 pGEM-Teasy 的构建结果 | 第48页 |
| ·重组 pcDNA3.1(-)和 pSC11M1 载体的构建结果 | 第48-50页 |
| ·质粒转染真核细胞蛋白表达结果 | 第50-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 重组 MVA-tPA-Ag85B-ESAT6 的制备 | 第53-64页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·病毒株和细胞系 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·MVA 重组与筛选 | 第54-55页 |
| ·重组 MVA 扩增方法 | 第55页 |
| ·重组 MVA 的纯化 | 第55-56页 |
| ·重组 MVA 的滴度测定 | 第56页 |
| ·重组 MVA 的检测 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-63页 |
| ·MVA-tPA-Ag85B-ESAT6 重组 | 第57-58页 |
| ·MVA-tPA-Ag85B-ESAT6 的筛选与扩增 | 第58-60页 |
| ·MVA 滴度检测 | 第60-61页 |
| ·重组 MVA 表达量检测与比较 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 MVA-tPA-Ag85B-EAST6 的免疫原性研究 | 第64-80页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·仪器试剂 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-70页 |
| ·动物免疫及方案 | 第65页 |
| ·脾淋巴细胞的分离 | 第65-66页 |
| ·体外细胞杀伤 CTL 实验 | 第66-67页 |
| ·ELISPOT 实验检测脾细胞受刺激物影响 IFN-γ分泌 | 第67-68页 |
| ·T 细胞亚型分群实验 | 第68页 |
| ·Th1/Th2 分型及 T 淋巴细胞增值 | 第68-69页 |
| ·酶联免疫吸附实验测定抗体分型 | 第69-70页 |
| ·实验结果 | 第70-79页 |
| ·CTL 体外杀伤结果 | 第70-71页 |
| ·ELISPOT 检测 IFN-γ分泌结果 | 第71-73页 |
| ·FCM 检测 T 细胞亚群分布 | 第73-75页 |
| ·Th1/Th2 细胞因子检测结果 | 第75-77页 |
| ·ELISA 测定小鼠血清抗体分型结果 | 第77-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 第六章 结论 | 第80-85页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| ·结论 | 第83页 |
| ·创新点与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 作者简介和科研成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
