| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·农作物病虫害防治 | 第10-11页 |
| ·农业防治 | 第10页 |
| ·生物防治 | 第10-11页 |
| ·物理防治 | 第11页 |
| ·化学防治 | 第11页 |
| ·转基因抗病虫植物的研究进展及种植情况 | 第11-13页 |
| ·抗虫转基因植物 | 第12页 |
| ·抗病转基因植物 | 第12-13页 |
| ·抗菌蛋白在植物抗病中的应用 | 第13-17页 |
| ·抗菌蛋白的作用机制 | 第13-14页 |
| ·抗菌蛋白的分类 | 第14-17页 |
| ·蛋白酶抑制剂的研究进展 | 第17-20页 |
| ·蛋白酶抑制剂概述 | 第17-18页 |
| ·蛋白酶抑制剂抗病、抗虫机理及其应用 | 第18-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-24页 |
| ·研究背景及意义 | 第20-22页 |
| ·论文研究技术路线 | 第22-24页 |
| 第三章 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·质粒载体及菌株 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·主要化学试剂和仪器设备 | 第24页 |
| ·缓冲液及培养基 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-38页 |
| ·引物设计及PscAFP基因的扩增 | 第26-27页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第27-28页 |
| ·PscAFP在毕赤酵母中表达及活性分析 | 第28-32页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌感受态的制备、质粒P_5-PscAFP的转化及验证 | 第33-34页 |
| ·烟草遗传转化及Km抗性烟草再生植株的获取 | 第34页 |
| ·转基因烟草T_1代种子GUS染色及分离比 | 第34页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第34-36页 |
| ·转基因烟草T_1抗病性检测 | 第36-38页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第38-52页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第38-39页 |
| ·酵母筛选 | 第39-40页 |
| ·PscAFP甲醇诱导表达 | 第40-44页 |
| ·PscAFP的诱导表达 | 第40-41页 |
| ·PscAFP浓度测定 | 第41页 |
| ·酵母表达蛋白PscAFP Western bolt结果 | 第41页 |
| ·PscAFP抑制力 | 第41-42页 |
| ·酵母表达PscAFP抑菌实验 | 第42-44页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·转基因烟草验证 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草RNA的提取及Actin和目标基因PscAFP扩增 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草T_1代GUS染色及分离比统计 | 第46页 |
| ·转基因烟草总蛋白Western bolt结果 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草抗病检测结果 | 第47-49页 |
| ·烟草离体叶片抗烟草赤星病检测结果 | 第47页 |
| ·T_1代转基因PscAFP烟草抗青枯病菌检测结果 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·PscAFP酵母表达 | 第49页 |
| ·PscAFP烟草遗传转化及抗病性分析 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 附录 | 第58页 |
