摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
·犬细小病毒的概述 | 第11-16页 |
·形态和理化特性 | 第11页 |
·抵抗力 | 第11页 |
·血凝性 | 第11页 |
·培养特性 | 第11-12页 |
·病毒的基因组特征 | 第12页 |
·病毒编码的蛋白 | 第12页 |
·VP2 结构蛋白 | 第12-13页 |
·CPV 的致病机理 | 第13-14页 |
·CPV 的变异 | 第14-15页 |
·犬细小病毒感染的症状及病理变化 | 第15页 |
·CPV 的诊断技术 | 第15-16页 |
·CPV 的防治研究 | 第16页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第16-19页 |
·杆状病毒概述 | 第16-17页 |
·杆状病毒表达系统概述 | 第17页 |
·杆状病毒表达系统表达外源基因特点 | 第17-18页 |
·Bac-to-Bac 表达系统 | 第18-19页 |
·实验目的及意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
·材料 | 第20页 |
·病毒 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-33页 |
·病毒的培养及鉴定 | 第20-22页 |
·病毒基因的克隆 | 第22-25页 |
·VP2 基因的瞬时表达 | 第25-26页 |
·VP2 基因在杆状病毒系统中的表达 | 第26-33页 |
3 结果 | 第33-48页 |
·病毒的鉴定 | 第33-34页 |
·病毒的免疫电镜观察 | 第33页 |
·病毒的血凝鉴定 | 第33页 |
·病毒的免疫酶染色法鉴定 | 第33-34页 |
·病毒滴度的测定 | 第34页 |
·病毒的基因克隆 | 第34-41页 |
·PCR 扩增 | 第34-35页 |
·重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
·CPV-LM 株主要蛋白基因序列分析 | 第36-41页 |
·VP2 基因真核表达质粒的构建 | 第41-42页 |
·VP2 基因真核表达质粒的构建 | 第41-42页 |
·VP2 基因真核细胞的瞬时表达 | 第42页 |
·VP2 基因在杆状病毒系统中的表达 | 第42-48页 |
·VP2 基因的制备 | 第43页 |
·构建重组转移载体质粒的鉴定 | 第43-44页 |
·获得重组杆粒的鉴定 | 第44页 |
·杆状病毒的 PCR 鉴定 | 第44页 |
·杆状病毒表达 VP2 基因的免疫电镜观察 | 第44-45页 |
·杆状病毒表达 VP2 蛋白的血凝性测定 | 第45页 |
·免疫酶染色法检测 VP2 蛋白的表达 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE 试验检测 VP2 蛋白的表达 | 第46-47页 |
·Western blot 检测 VP2 蛋白的表达 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
·病毒的培养及鉴定 | 第48页 |
·CPV-LM 株序列分析 | 第48-50页 |
·犬细小病毒 NS 基因的分析 | 第49页 |
·犬细小病毒 VP2 基因的序列分析 | 第49-50页 |
·VP2 基因的真核表达 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
附录 | 第59-62页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第62页 |