中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
研究现状、成果 | 第13-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
对象和方法 | 第17-43页 |
1.1 实验材料 | 第17-20页 |
1.1.1 实验动物 | 第17页 |
1.1.2 细胞系 | 第17页 |
1.1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.1.4 实验试剂及耗材 | 第18-20页 |
1.1.5 引物 | 第20页 |
1.1.6 主要分析工具软件 | 第20页 |
1.2 试剂配方 | 第20-25页 |
1.3 主要实验技术流程 | 第25-43页 |
1.3.1 细胞传代及培养 | 第25-26页 |
1.3.2 细胞计数 | 第26页 |
1.3.3 细胞冻存 | 第26页 |
1.3.4 CCK8细胞增殖实验 | 第26-27页 |
1.3.5 目的质粒及包装质粒提取(Promega试剂盒) | 第27页 |
1.3.6 目的质粒与包装质粒大提 | 第27-28页 |
1.3.7 慢病毒制备及细胞转染 | 第28-29页 |
1.3.8 细胞蛋白提取及蛋白浓度检测 | 第29-30页 |
1.3.9 WesternBlot检测目的蛋白表达 | 第30-31页 |
1.3.10 收集细胞上清中细胞系来源exosomes | 第31页 |
1.3.11 蔗糖梯度纯化exosomes | 第31-32页 |
1.3.12 Exosomes磷钨酸染色及电镜下观察 | 第32页 |
1.3.13 小鼠皮下瘤模型建立 | 第32页 |
1.3.14 小鼠肝癌原位瘤模型建模 | 第32-33页 |
1.3.15 Exosomes与佐剂共孵育后刺激DC及小鼠的系统注射 | 第33页 |
1.3.16 小鼠的眼底静脉丛取血 | 第33页 |
1.3.17 免疫组织化学染色(IHC) | 第33-35页 |
1.3.18 苏木素-伊红病理染色(H&E) | 第35-36页 |
1.3.19 小鼠皮下瘤治疗及测量 | 第36页 |
1.3.20 核磁监测小鼠原位瘤 | 第36页 |
1.3.21 分离小鼠外周血中的淋巴细胞 | 第36页 |
1.3.22 分离肿瘤组织中浸润的淋巴细胞 | 第36-37页 |
1.3.23 肿瘤组织匀浆制备 | 第37页 |
1.3.24 分离脾脏(淋巴结)中的淋巴细胞(树突状细胞) | 第37页 |
1.3.25 淋巴(树突状细胞)细胞膜蛋白染色 | 第37-38页 |
1.3.26 淋巴细胞核蛋白染色 | 第38页 |
1.3.27 淋巴细胞体外再刺激及胞浆内抗体染色 | 第38页 |
1.3.28 ELISA检测免疫微环境中的细胞因子 | 第38-39页 |
1.3.29 Exosomes表面蛋白免疫染色 | 第39页 |
1.3.30 N1ND活化后的DC细胞的特异性杀伤实验 | 第39-40页 |
1.3.31 琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
1.3.32 DC细胞系靶sgRNA设计及载体构建 | 第40-43页 |
结果 | 第43-62页 |
2.1 HMGN1蛋白介导的抗肝癌作用研究 | 第43-44页 |
2.1.1 Hepa1-6HMGN1细胞系的建立及皮下瘤生长速率比较 | 第43-44页 |
2.2 N1ND修饰的TEX(N1ND-TEX)介导DC免疫治疗研究 | 第44-62页 |
2.2.1 Hepa1-6细胞系来源的exosomes的理化表征检测 | 第44-45页 |
2.2.2 N1ND-TEX对DC的活化作用 | 第45-47页 |
2.2.3 DCN1ND-TEX介导的抗原特异性反应 | 第47-48页 |
2.2.4 DCN1ND-TEX对肝癌的抑瘤作用研究 | 第48-56页 |
2.2.5 DCN1ND-TEX介导长期特异抗肿瘤免疫应答作用机制探究 | 第56-58页 |
2.2.6 N1ND修饰的TEX体外介导DC活化机制探究 | 第58-59页 |
2.2.7 HMGN1临床相关性及其功能肽N1ND临床适用性验证 | 第59-62页 |
讨论 | 第62-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
综述 外泌体在肿瘤免疫中的相关作用研究 | 第72-83页 |
综述参考文献 | 第78-83页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
个人简历 | 第86页 |