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预警素对外泌体介导的肝癌免疫治疗作用研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略语第12-13页
前言第13-17页
    研究现状、成果第13-16页
    研究目的、方法第16-17页
对象和方法第17-43页
    1.1 实验材料第17-20页
        1.1.1 实验动物第17页
        1.1.2 细胞系第17页
        1.1.3 主要仪器设备第17-18页
        1.1.4 实验试剂及耗材第18-20页
        1.1.5 引物第20页
        1.1.6 主要分析工具软件第20页
    1.2 试剂配方第20-25页
    1.3 主要实验技术流程第25-43页
        1.3.1 细胞传代及培养第25-26页
        1.3.2 细胞计数第26页
        1.3.3 细胞冻存第26页
        1.3.4 CCK8细胞增殖实验第26-27页
        1.3.5 目的质粒及包装质粒提取(Promega试剂盒)第27页
        1.3.6 目的质粒与包装质粒大提第27-28页
        1.3.7 慢病毒制备及细胞转染第28-29页
        1.3.8 细胞蛋白提取及蛋白浓度检测第29-30页
        1.3.9 WesternBlot检测目的蛋白表达第30-31页
        1.3.10 收集细胞上清中细胞系来源exosomes第31页
        1.3.11 蔗糖梯度纯化exosomes第31-32页
        1.3.12 Exosomes磷钨酸染色及电镜下观察第32页
        1.3.13 小鼠皮下瘤模型建立第32页
        1.3.14 小鼠肝癌原位瘤模型建模第32-33页
        1.3.15 Exosomes与佐剂共孵育后刺激DC及小鼠的系统注射第33页
        1.3.16 小鼠的眼底静脉丛取血第33页
        1.3.17 免疫组织化学染色(IHC)第33-35页
        1.3.18 苏木素-伊红病理染色(H&E)第35-36页
        1.3.19 小鼠皮下瘤治疗及测量第36页
        1.3.20 核磁监测小鼠原位瘤第36页
        1.3.21 分离小鼠外周血中的淋巴细胞第36页
        1.3.22 分离肿瘤组织中浸润的淋巴细胞第36-37页
        1.3.23 肿瘤组织匀浆制备第37页
        1.3.24 分离脾脏(淋巴结)中的淋巴细胞(树突状细胞)第37页
        1.3.25 淋巴(树突状细胞)细胞膜蛋白染色第37-38页
        1.3.26 淋巴细胞核蛋白染色第38页
        1.3.27 淋巴细胞体外再刺激及胞浆内抗体染色第38页
        1.3.28 ELISA检测免疫微环境中的细胞因子第38-39页
        1.3.29 Exosomes表面蛋白免疫染色第39页
        1.3.30 N1ND活化后的DC细胞的特异性杀伤实验第39-40页
        1.3.31 琼脂糖凝胶电泳第40页
        1.3.32 DC细胞系靶sgRNA设计及载体构建第40-43页
结果第43-62页
    2.1 HMGN1蛋白介导的抗肝癌作用研究第43-44页
        2.1.1 Hepa1-6HMGN1细胞系的建立及皮下瘤生长速率比较第43-44页
    2.2 N1ND修饰的TEX(N1ND-TEX)介导DC免疫治疗研究第44-62页
        2.2.1 Hepa1-6细胞系来源的exosomes的理化表征检测第44-45页
        2.2.2 N1ND-TEX对DC的活化作用第45-47页
        2.2.3 DCN1ND-TEX介导的抗原特异性反应第47-48页
        2.2.4 DCN1ND-TEX对肝癌的抑瘤作用研究第48-56页
        2.2.5 DCN1ND-TEX介导长期特异抗肿瘤免疫应答作用机制探究第56-58页
        2.2.6 N1ND修饰的TEX体外介导DC活化机制探究第58-59页
        2.2.7 HMGN1临床相关性及其功能肽N1ND临床适用性验证第59-62页
讨论第62-65页
结论第65-66页
参考文献第66-72页
综述 外泌体在肿瘤免疫中的相关作用研究第72-83页
    综述参考文献第78-83页
发表论文和参加科研情况说明第83-84页
致谢第84-86页
个人简历第86页

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