中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第10-12页 |
前言 | 第12-21页 |
研究现状、成果 | 第12-19页 |
研究目的、方法 | 第19-21页 |
对象和方法 | 第21-49页 |
1.1 细胞和质粒 | 第21页 |
1.2 主要试剂 | 第21-23页 |
1.2.1 主要抗体 | 第21-22页 |
1.2.2 主要试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
1.3 主要溶液、缓冲液与培养基 | 第23-28页 |
1.3.1 蛋白和核酸相关溶液及缓冲液 | 第23-26页 |
1.3.2 ChIP相关溶液及缓冲液 | 第26-28页 |
1.3.3 MeDIP相关溶液及缓冲液 | 第28页 |
1.4 主要仪器、设备 | 第28-29页 |
1.5 实验方法与流程 | 第29-49页 |
1.5.1 细胞培养、转染及感染 | 第29-30页 |
1.5.2 WesternBlot | 第30-32页 |
1.5.3 RNA的提取、逆转录及实时定量PCR | 第32-34页 |
1.5.4 细胞表型相关实验 | 第34-36页 |
1.5.5 亚硫酸氢盐修饰后克隆测序PCR法(BSP) | 第36-39页 |
1.5.6 甲基化的DNA免疫共沉淀法(MeDIP) | 第39-40页 |
1.5.7 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第40-43页 |
1.5.8 DNMT3A-promoter-GLUC表达质粒的构建 | 第43-46页 |
1.5.9 虫荧光素酶活性检测 | 第46-49页 |
结果 | 第49-55页 |
2.1 SND1蛋白稳定敲低的细胞株的构建及鉴定 | 第49页 |
2.2 SND1蛋白促进乳腺癌上皮间质转化及血管生成拟态的发生 | 第49-50页 |
2.3 SND1抑制E-cadherin的表达 | 第50-51页 |
2.4 SND1通过影响E-cadherin启动子甲基化进而影响其表达 | 第51-52页 |
2.5 SND1通过影响DNMT3A的表达进一步影响CDH1启动子的甲基化 | 第52-55页 |
讨论 | 第55-60页 |
3.1 SND1表达异常是多种肿瘤发生发展进程中的共有现象 | 第55-56页 |
3.2 SND1在乳腺癌中的作用及作用方式 | 第56-57页 |
3.3 SND1对下游基因调控的全新方式 | 第57-58页 |
3.4 SND1与上皮间质转化及血管生成拟态 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第68-69页 |
综述 上皮间质转化与表观遗传学调控 | 第69-82页 |
综述参考文献 | 第75-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
个人简历 | 第84页 |