| 博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-37页 |
| 1.1 黄瓜绿斑驳花叶病毒研究进展 | 第16-21页 |
| 1.1.1 分布及寄主范围 | 第16页 |
| 1.1.2 症状及危害 | 第16-17页 |
| 1.1.3 传播方式 | 第17页 |
| 1.1.4 病毒粒子特征及基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.1.5 检测方法 | 第18-19页 |
| 1.1.6 CGMMV的防治 | 第19-21页 |
| 1.2 烟草花叶病毒属病毒蛋白的功能和与寄主互作研究进展 | 第21-26页 |
| 1.2.1 生物学特性和基因组结构 | 第21页 |
| 1.2.2 复制相关蛋白的功能及与其互作的寄主蛋白 | 第21-25页 |
| 1.2.3 移动蛋白的功能及与其互作的寄主蛋白 | 第25-26页 |
| 1.2.4 外壳蛋白的功能和与其互作的寄主蛋白 | 第26页 |
| 1.3 植物热激蛋白的功能和与病毒互作研究进展 | 第26-31页 |
| 1.3.1 植物热激蛋白的分类和功能 | 第26-29页 |
| 1.3.2 植物热激蛋白与病毒的互作 | 第29-31页 |
| 1.4 蛋白互作的筛选方法 | 第31-35页 |
| 1.4.1 酵母双杂交系统 | 第31-33页 |
| 1.4.2 双分子荧光互补技术 | 第33页 |
| 1.4.3 GST Pull-down技术 | 第33-34页 |
| 1.4.4 免疫共沉淀技术 | 第34-35页 |
| 1.5 本研究的目的意义及技术路线 | 第35-37页 |
| 1.5.1 本研究的目的意义 | 第35-36页 |
| 1.5.2 本研究的主要技术路线 | 第36-37页 |
| 第二章 与CGMMV CP和HEL互作的西瓜蛋白筛选 | 第37-57页 |
| 2.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 供试样品 | 第37页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第37页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.4 相关溶液的配制 | 第38页 |
| 2.2 试验方法 | 第38-47页 |
| 2.2.1 感CGMMV西瓜茎叶组织的cDNA文库构建 | 第38-41页 |
| 2.2.2 文库质量和滴度检测 | 第41页 |
| 2.2.3 pGBKT7-CP和pGBKT7-HEL诱饵载体的构建 | 第41-44页 |
| 2.2.4 pGBKT7-CP和pGBKT7-HEL的转化、自激活和毒性检测 | 第44-45页 |
| 2.2.5 利用pGBKT7-CP和pGBKT7-HEL诱饵载体筛选西瓜cDNA文库 | 第45-47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-55页 |
| 2.3.1 感CGMMV西瓜茎叶组织的cDNA文库构建 | 第47-49页 |
| 2.3.2 pGBKT7-CP和pGBKT7-HEL诱饵载体的构建 | 第49-52页 |
| 2.3.3 利用pGBKT7-CP和pGBKT7-HEL诱饵载体筛选西瓜cDNA文库 | 第52-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-56页 |
| 2.5 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 CGMMV HEL与寄主sHSP的互作验证 | 第57-70页 |
| 3.1 试验材料 | 第57-58页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第57页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第57页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第57-58页 |
| 3.1.4 相关溶液的配制 | 第58页 |
| 3.2 试验方法 | 第58-65页 |
| 3.2.1 CGMMV的p129及不同结构域与寄主sHSP的互作验证 | 第58-59页 |
| 3.2.2 GST Pull-down验证CGMMV HEL与寄主sHSP的互作 | 第59-62页 |
| 3.2.3 Co-IP验证CGMMV HEL与寄主sHSP的互作 | 第62-65页 |
| 3.3 结果与分析 | 第65-68页 |
| 3.3.1 CGMMV的p129及不同结构域与寄主sHSP的互作验证 | 第65-66页 |
| 3.3.2 GST Pull-down验证CGMMV HEL与寄主sHSP的互作 | 第66-67页 |
| 3.3.3 Co-IP验证CGMMV HEL与寄主sHSP的互作 | 第67-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-69页 |
| 3.5 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 CGMMV HEL与寄主sHSP互作的生物学意义研究 | 第70-86页 |
| 4.1 试验材料 | 第70-71页 |
| 4.1.1 菌株和载体 | 第70页 |
| 4.1.2 试验仪器 | 第70页 |
| 4.1.3 试验试剂 | 第70页 |
| 4.1.4 相关溶液、培养基的配制 | 第70-71页 |
| 4.2 试验方法 | 第71-77页 |
| 4.2.1 CGMMV侵染引起的寄主sHSP的表达差异分析 | 第71-72页 |
| 4.2.2 亚细胞定位分析 | 第72页 |
| 4.2.3 沉默和超量表达NbsHSP的转基因烟草的获得 | 第72-74页 |
| 4.2.4 CGMMV检测 | 第74-77页 |
| 4.3 结果与分析 | 第77-82页 |
| 4.3.1 CGMMV侵染引起的寄主sHSP的表达差异分析 | 第77-78页 |
| 4.3.2 亚细胞定位分析 | 第78页 |
| 4.3.3 沉默和超量表达NbsHSP的转基因烟草的获得 | 第78-82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-84页 |
| 4.5 小结 | 第84-86页 |
| 第五章 全文结论 | 第86-88页 |
| 5.1 全文结论 | 第86页 |
| 5.2 创新点 | 第86页 |
| 5.3 下一步工作展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 作者简历 | 第104页 |
