摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 藻蓝胆素 | 第11-13页 |
1.1.1 藻胆色素的简介 | 第11页 |
1.1.2 藻胆蛋白的简介 | 第11-12页 |
1.1.3 藻胆色素的生物合成 | 第12-13页 |
1.2 血红素 | 第13-17页 |
1.2.1 血红素的化学结构及生理活性 | 第13-14页 |
1.2.2 血红素的生物合成 | 第14-17页 |
1.3 5-氨基乙酰丙酸 | 第17-20页 |
1.3.1 ALA的化学结构及生理活性 | 第17页 |
1.3.2 ALA的生物合成 | 第17-20页 |
1.4 藻蓝胆素的制备方法 | 第20-21页 |
1.4.1 藻类天然色素的提取 | 第20页 |
1.4.2 基因工程制备 | 第20-21页 |
1.4.3 藻蓝胆素的定量方法 | 第21页 |
1.6 藻蓝胆素的应用研究 | 第21-22页 |
1.7 本论文的研究内容及意义 | 第22-23页 |
第二章 不同类型的表达载体对藻蓝胆素合成的影响 | 第23-45页 |
2.1 前言 | 第23-24页 |
2.2 实验材料 | 第24-28页 |
2.2.1 质粒和引物 | 第24-26页 |
2.2.2 药品和仪器 | 第26-27页 |
2.2.3 培养基及溶液的配置 | 第27-28页 |
2.3 实验部分 | 第28-32页 |
2.3.1 质粒pETDuet-hox1-pcyA的构建 | 第28-30页 |
2.3.2 菌株培养条件的优化 | 第30页 |
2.3.3 关键代谢产物的检测 | 第30-32页 |
2.4 实验结果 | 第32-44页 |
2.4.1 质粒pETDuet-hox1-pcyA的构建 | 第32-34页 |
2.4.2 藻蓝胆素的表达 | 第34-36页 |
2.4.3 藻蓝胆素表达条件的优化 | 第36-40页 |
2.4.4 不同大肠杆菌菌株体内Hox1,PcyA两种酶数量的比较 | 第40-42页 |
2.4.5 关键代谢产物的检测 | 第42-44页 |
2.5 本章小结 | 第44-45页 |
第三章 血红素合成途径关键基因的调控对藻蓝胆素合成的影响 | 第45-57页 |
3.1 前言 | 第45-46页 |
3.2 实验材料 | 第46-48页 |
3.2.1 质粒和引物 | 第46-47页 |
3.2.2 药品和仪器 | 第47-48页 |
3.3 实验方法 | 第48页 |
3.3.1 质粒构建过程 | 第48页 |
3.3.2 基因组的提取 | 第48页 |
3.3.3 关键代谢产物的检测 | 第48页 |
3.4 实验结果 | 第48-56页 |
3.4.1 质粒pET-28a-hemB,pCDFDuet-hemG-hemH,pACYCDuet-hemAs-hemL的构建 | 第48-52页 |
3.4.2 heme上游基因hemB,hemG,hemH的调控表达对代谢产物的影响 | 第52-54页 |
3.4.3 ALA上游基因hemAs,hemL调控表达对代谢产物的影响 | 第54-56页 |
3.5 本章小结 | 第56-57页 |
第四章 提高hox1和pcyA基因的拷贝数对藻蓝胆素合成的影响 | 第57-67页 |
4.1 前言 | 第57页 |
4.2 实验材料 | 第57-58页 |
4.2.1 质粒和引物 | 第57-58页 |
4.3 实验方法 | 第58-59页 |
4.3.1 质粒构建过程 | 第58页 |
4.3.2 关键代谢产物的检测 | 第58-59页 |
4.4 实验结果 | 第59-66页 |
4.4.1 质粒pETDuet-hox1-hox1-pcyA-pcyA的构建 | 第59-60页 |
4.4.2 加强heme下游基因hox1,pcyA的表达对代谢产物的影响 | 第60-62页 |
4.4.3 加强heme上游基因hemB,hemG,hemH的表达对代谢产物的影响 | 第62-64页 |
4.4.4 加强ALA上游基因hemAs,hemL的表达对代谢产物的影响 | 第64-66页 |
4.5 本章小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
附录 | 第80-89页 |
攻读硕士学位期间取得的成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90页 |