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基因重组藻蓝胆素的组合生物合成及其代谢调控研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 藻蓝胆素第11-13页
        1.1.1 藻胆色素的简介第11页
        1.1.2 藻胆蛋白的简介第11-12页
        1.1.3 藻胆色素的生物合成第12-13页
    1.2 血红素第13-17页
        1.2.1 血红素的化学结构及生理活性第13-14页
        1.2.2 血红素的生物合成第14-17页
    1.3 5-氨基乙酰丙酸第17-20页
        1.3.1 ALA的化学结构及生理活性第17页
        1.3.2 ALA的生物合成第17-20页
    1.4 藻蓝胆素的制备方法第20-21页
        1.4.1 藻类天然色素的提取第20页
        1.4.2 基因工程制备第20-21页
        1.4.3 藻蓝胆素的定量方法第21页
    1.6 藻蓝胆素的应用研究第21-22页
    1.7 本论文的研究内容及意义第22-23页
第二章 不同类型的表达载体对藻蓝胆素合成的影响第23-45页
    2.1 前言第23-24页
    2.2 实验材料第24-28页
        2.2.1 质粒和引物第24-26页
        2.2.2 药品和仪器第26-27页
        2.2.3 培养基及溶液的配置第27-28页
    2.3 实验部分第28-32页
        2.3.1 质粒pETDuet-hox1-pcyA的构建第28-30页
        2.3.2 菌株培养条件的优化第30页
        2.3.3 关键代谢产物的检测第30-32页
    2.4 实验结果第32-44页
        2.4.1 质粒pETDuet-hox1-pcyA的构建第32-34页
        2.4.2 藻蓝胆素的表达第34-36页
        2.4.3 藻蓝胆素表达条件的优化第36-40页
        2.4.4 不同大肠杆菌菌株体内Hox1,PcyA两种酶数量的比较第40-42页
        2.4.5 关键代谢产物的检测第42-44页
    2.5 本章小结第44-45页
第三章 血红素合成途径关键基因的调控对藻蓝胆素合成的影响第45-57页
    3.1 前言第45-46页
    3.2 实验材料第46-48页
        3.2.1 质粒和引物第46-47页
        3.2.2 药品和仪器第47-48页
    3.3 实验方法第48页
        3.3.1 质粒构建过程第48页
        3.3.2 基因组的提取第48页
        3.3.3 关键代谢产物的检测第48页
    3.4 实验结果第48-56页
        3.4.1 质粒pET-28a-hemB,pCDFDuet-hemG-hemH,pACYCDuet-hemAs-hemL的构建第48-52页
        3.4.2 heme上游基因hemB,hemG,hemH的调控表达对代谢产物的影响第52-54页
        3.4.3 ALA上游基因hemAs,hemL调控表达对代谢产物的影响第54-56页
    3.5 本章小结第56-57页
第四章 提高hox1和pcyA基因的拷贝数对藻蓝胆素合成的影响第57-67页
    4.1 前言第57页
    4.2 实验材料第57-58页
        4.2.1 质粒和引物第57-58页
    4.3 实验方法第58-59页
        4.3.1 质粒构建过程第58页
        4.3.2 关键代谢产物的检测第58-59页
    4.4 实验结果第59-66页
        4.4.1 质粒pETDuet-hox1-hox1-pcyA-pcyA的构建第59-60页
        4.4.2 加强heme下游基因hox1,pcyA的表达对代谢产物的影响第60-62页
        4.4.3 加强heme上游基因hemB,hemG,hemH的表达对代谢产物的影响第62-64页
        4.4.4 加强ALA上游基因hemAs,hemL的表达对代谢产物的影响第64-66页
    4.5 本章小结第66-67页
结论第67-68页
参考文献第68-80页
附录第80-89页
攻读硕士学位期间取得的成果第89-90页
致谢第90页

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