| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 综述 | 第13-19页 |
| 1.1 蜱类简介 | 第13页 |
| 1.2 蜱类生殖简介 | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白质组学简介 | 第14-15页 |
| 1.4 蛋白质翻译后修饰 | 第15-16页 |
| 1.4.1 蛋白质翻译后修饰 | 第15页 |
| 1.4.2 蛋白质磷酸化修饰 | 第15-16页 |
| 1.5 RNA干扰技术及其应用 | 第16-17页 |
| 1.6 实时荧光定量PCR技术及其应用 | 第17-19页 |
| 第2章 长角血蜱饱血后卵巢蛋白质的动态变化及其功能分析 | 第19-69页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器及耗材 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 组织解剖及蛋白提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 蛋白酶解 | 第20-21页 |
| 2.2.2.1 全蛋白实验酶解 | 第20-21页 |
| 2.2.2.2 磷酸化实验酶解 | 第21页 |
| 2.2.3 脱盐 | 第21-22页 |
| 2.2.4 磷酸化富集 | 第22页 |
| 2.2.5 样品高 pH 反相 HPLC 分离 | 第22-23页 |
| 2.2.5.1 全蛋白样品高 pH 反相 HPLC 分离 | 第22-23页 |
| 2.2.5.2 磷酸化样品高 pH 反相 HPLC 分离 | 第23页 |
| 2.2.6 LC-MS/MS 分析 | 第23-24页 |
| 2.2.6.1 DDA建库质谱数据分析 | 第23-24页 |
| 2.2.6.2 DIA质谱数据分析 | 第24页 |
| 2.2.7 搜库分析 | 第24页 |
| 2.2.7.1 DDA建库 | 第24页 |
| 2.2.7.2 DIA质谱数据比对 | 第24页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.2.8.1 数据统计与分析 | 第24页 |
| 2.2.8.2 GO富集分析 | 第24-25页 |
| 2.2.8.3 Cluster 聚类分析 | 第25页 |
| 2.2.8.4 KEGG信号通路分析 | 第25页 |
| 2.2.8.5 蛋白互作分析 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-61页 |
| 2.3.1 全蛋白实验结果 | 第25-41页 |
| 2.3.1.1 蛋白鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.1.2 GO富集分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1.3 聚类分析 | 第30-31页 |
| 2.3.1.4 差异表达蛋白GO功能注释 | 第31-37页 |
| 2.3.1.5 差异表达蛋白KEGG通路分析 | 第37-40页 |
| 2.3.1.6 蛋白互作分析 | 第40-41页 |
| 2.3.2 磷酸化实验结果 | 第41-61页 |
| 2.3.2.1 磷酸化蛋白定量结果 | 第41-43页 |
| 2.3.2.2 实验数据分析 | 第43页 |
| 2.3.2.3 GO富集分析 | 第43-45页 |
| 2.3.2.4 差异表达磷酸化肽段上下调分析 | 第45-53页 |
| 2.3.2.5 上下调肽段GO富集分析 | 第53-57页 |
| 2.3.2.6 KEGG信号通路分析 | 第57-60页 |
| 2.3.2.7 PPI蛋白互作分析 | 第60-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-69页 |
| 第3章 筛选出的关键蛋白 RNA 干扰及 qPCR 分析 | 第69-82页 |
| 3.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第69页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第69页 |
| 3.1.3 实验仪器及耗材 | 第69-70页 |
| 3.2 实验方法 | 第70-78页 |
| 3.2.1 雌蜱总RNA的提取 | 第70页 |
| 3.2.2 cDNA一链合成 | 第70-71页 |
| 3.2.3 目的片段扩增 | 第71-72页 |
| 3.2.4 PCR产物电泳检测及产物回收 | 第72-73页 |
| 3.2.5 目的基因的连接与转化 | 第73-74页 |
| 3.2.6 目的基因测序与比对 | 第74页 |
| 3.2.7 含T7启动子目的片段的扩增 | 第74-75页 |
| 3.2.8 dsRNA的合成 | 第75-76页 |
| 3.2.9 dsRNA的注射 | 第76页 |
| 3.2.9.1 饥饿期雌蜱dsRNA的注射 | 第76页 |
| 3.2.9.2 饱血期雌蜱dsRNA的注射 | 第76页 |
| 3.2.10荧光定量PCR实验 | 第76-78页 |
| 3.3 实验结果 | 第78-80页 |
| 3.3.1 荧光定量结果 | 第78页 |
| 3.3.2 干扰结果 | 第78-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
