| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Absract | 第13-18页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-29页 |
| 1.1 引言 | 第20页 |
| 1.2 植物免疫系统研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3 植物免疫系统中的病程相关蛋白 | 第22-24页 |
| 1.4 植物几丁质酶研究进展 | 第24-26页 |
| 1.5 烟草灰霉菌和白粉病研究进展 | 第26-27页 |
| 1.6 杜仲抗真菌蛋白的研究进展 | 第27页 |
| 本论文的研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 杜仲几丁质酶基因克隆及结构分析 | 第29-76页 |
| 2.1 材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 植物与菌株 | 第29页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 杜仲转录组信息筛选 | 第31-34页 |
| 2.2.2 杜仲几丁质酶基因SMARTerRACE引物设计 | 第34-35页 |
| 2.2.3 杜仲叶和茎RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.2.4 杜仲几丁质酶基因的RACE扩增 | 第36-40页 |
| 2.2.5 杜仲几丁质酶基因RACE扩增产物测序与拼接 | 第40页 |
| 2.2.6 杜仲几丁质酶基因开放阅读框克隆 | 第40-45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-73页 |
| 2.3.1 杜仲总RNA | 第45页 |
| 2.3.2 杜仲几丁质酶基因的5’-(3’-)端的获得 | 第45-46页 |
| 2.3.3 杜仲几丁质酶基因的5’-(3’-)端拼接结果 | 第46-51页 |
| 2.3.4 杜仲几丁质酶生物信息学分析结果 | 第51-73页 |
| 2.3.5 杜仲几丁质酶基因 | 第73页 |
| 2.4 讨论 | 第73-75页 |
| 2.5 小结 | 第75-76页 |
| 第三章 杜仲几丁质酶基因表达模式 | 第76-85页 |
| 3.1 仪器材料 | 第76-78页 |
| 3.1.1 植物材料与菌株 | 第76页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第76-77页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第77页 |
| 3.1.4 培养基 | 第77-78页 |
| 3.2 方法 | 第78-81页 |
| 3.2.1 引物设计及合成 | 第78-79页 |
| 3.2.2 镰刀菌(F.oxysporum)接种杜仲苗 | 第79-80页 |
| 3.2.3 杜仲根茎叶RNA的提取 | 第80页 |
| 3.2.4 cDNA第一链合成 | 第80-81页 |
| 3.2.5 杜总几丁质酶基因Real-timePCR检测分析 | 第81页 |
| 3.3 结果与分析 | 第81-83页 |
| 3.3.1 杜总几丁质酶基因组织特异性表达分析结果 | 第81-82页 |
| 3.3.2 接种镰刀菌后表达量分析 | 第82-83页 |
| 3.4 讨论 | 第83-84页 |
| 3.5 小结 | 第84-85页 |
| 第四章 杜仲应答尖孢镰刀菌侵染蛋白质组研究 | 第85-101页 |
| 4.1 材料 | 第86-87页 |
| 4.1.1 植物材料与菌株(见第三章) | 第86页 |
| 4.1.2 蛋白提取主要药品试剂 | 第86页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第86-87页 |
| 4.2 方法 | 第87-91页 |
| 4.2.1 镰刀菌接种杜仲苗(见第三章) | 第87页 |
| 4.2.2 杜仲样品总蛋白质的提取 | 第87-90页 |
| 4.2.3 蛋白质谱数据分析 | 第90页 |
| 4.2.4 蛋白质鉴定信息统计 | 第90-91页 |
| 4.3 结果与分析 | 第91-99页 |
| 4.3.1 蛋白质数据质量评估 | 第91-92页 |
| 4.3.2 转录组注释分析 | 第92-93页 |
| 4.3.3 GO分析 | 第93-96页 |
| 4.3.4 KEGG分析 | 第96页 |
| 4.3.5 抗菌响应蛋白分析 | 第96-99页 |
| 4.4 讨论 | 第99-100页 |
| 4.5 小结 | 第100-101页 |
| 第五章 杜仲几丁质酶抗菌功能分析 | 第101-128页 |
| 5.1 材料 | 第101-103页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第101-102页 |
| 5.1.2 质粒和菌株 | 第102页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第102页 |
| 5.1.4 培养用试剂及培养基 | 第102页 |
| 5.1.5 主要仪器设备 | 第102-103页 |
| 5.2 方法 | 第103-112页 |
| 5.2.1 EuCHITs植物表达载体构建 | 第103-104页 |
| 5.2.2 农杆菌LBA4404感受态细胞制备及转化 | 第104-105页 |
| 5.2.3 农杆菌介导法遗传转化烟草 | 第105-106页 |
| 5.2.4 EuCHIT3基因的植物表达载体的构建及遗传转化 | 第106-108页 |
| 5.2.5 转基因抗性植株的Gus组织化学染色 | 第108页 |
| 5.2.6 抗性烟草的PCR检测 | 第108-109页 |
| 5.2.7 过表达EuCHIT1烟草抗烟草灰霉病抗病性分析 | 第109-110页 |
| 5.2.8 过表达EuCHIT2烟草对白粉病的抗病性分析 | 第110页 |
| 5.2.9 烟草的几丁质酶活性测定 | 第110-111页 |
| 5.2.10 保护性酶活测定 | 第111-112页 |
| 5.2.11 抗病相关基因相对表达量检测 | 第112页 |
| 5.3 结果与分析 | 第112-124页 |
| 5.3.1 获得植物表达载体和转基因烟草 | 第112-115页 |
| 5.3.2 杜仲几丁质酶基因对烟草抗真菌性的影响 | 第115-118页 |
| 5.3.3 EuCHITs对烟草几丁质酶酶活的影响 | 第118-120页 |
| 5.3.4 EuCHITs烟草保护性酶活的影响 | 第120-122页 |
| 5.3.5 EuCHIT1和EuCHIT2基因对烟草抗病相关基因的影响 | 第122-124页 |
| 5.4 讨论 | 第124-127页 |
| 5.5 小结 | 第127-128页 |
| 第六章 结论、创新及展望 | 第128-131页 |
| 1、研究结论 | 第128-129页 |
| 2.创新 | 第129-130页 |
| 3.展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-138页 |
| 附录 | 第138-141页 |
