致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 麦蚜的种类及危害 | 第10-11页 |
1.2 小麦抗虫鉴定的重要性 | 第11页 |
1.3 RNA干扰的定义 | 第11页 |
1.4 RNA干扰的发展史 | 第11-12页 |
1.5 自主和非自主性RNAi | 第12-14页 |
1.6 昆虫吸收dsRNA的机制 | 第14-15页 |
1.6.1 线虫中SID蛋白 | 第14页 |
1.6.2 果蝇中的清道夫受体 | 第14页 |
1.6.3 RNAi应答基因 | 第14-15页 |
1.7 蚜虫RNAi研究进展 | 第15-17页 |
1.8 RNAi技术防治害虫的优势 | 第17页 |
1.9 小麦蚜虫RNAi研究进展 | 第17-18页 |
1.9.1 麦蚜离体饲喂与dsRNA导入方法进展 | 第17-18页 |
1.9.2 小麦蚜虫RNAi研究现状 | 第18页 |
1.10 本研究的目的与意义及技术路线 | 第18-20页 |
1.10.1 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
1.10.2 技术路线 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-28页 |
3.1 实验材料 | 第21页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第21页 |
3.1.2 植物材料 | 第21页 |
3.2 主要仪器设备 | 第21页 |
3.3 实验所用试剂 | 第21页 |
3.4 常用溶液的配制及保存 | 第21-23页 |
3.5 试验方法 | 第23-28页 |
3.5.1 麦长管蚜的生长历期情况 | 第23页 |
3.5.2 小麦-亲缘种属附加系的抗虫鉴定 | 第23-24页 |
3.5.3 小麦蚜虫饲喂体系的构建 | 第24页 |
3.5.3.1 饲喂环境的优化 | 第24页 |
3.5.3.2 饲料对麦长管蚜的影响 | 第24页 |
3.5.4 基因沉默对麦长管蚜的影响 | 第24页 |
3.5.5 同源克隆 | 第24页 |
3.5.6 总RNA的提取纯化与检测 | 第24-25页 |
3.5.7 反转录反应 | 第25-26页 |
3.5.8 PCR扩增反应 | 第26-27页 |
3.5.9 候选基因双链RNA的合成与纯化 | 第27-28页 |
3.5.10 荧光定量检测 | 第28页 |
3.6 统计分析方法 | 第28页 |
4 结果与分析 | 第28-51页 |
4.1 麦长管蚜生长发育历期 | 第28-29页 |
4.2 小麦-亲缘种属附加系抗虫鉴定结果 | 第29-32页 |
4.3 小麦蚜虫饲喂体系的构建 | 第32-35页 |
4.4 RNA的提取与检测结果 | 第35-36页 |
4.5 候选基因的PCR扩增与检测结果 | 第36-37页 |
4.6 候选基因的双链RNA合成与检测结果 | 第37-38页 |
4.7 基因沉默对麦长管蚜的影响 | 第38-45页 |
4.7.1 不同基因沉默对麦长管蚜的影响 | 第38-43页 |
4.7.2 基因不同区段的沉默对麦长管蚜的影响 | 第43-45页 |
4.8 荧光定量检测 | 第45-51页 |
5 结论与讨论 | 第51-54页 |
5.1 周麦18幼苗上蚜虫的生长历期 | 第51-52页 |
5.2 中国春-亲缘种属添加系的抗虫鉴定与抗性基因定位 | 第52页 |
5.3 纯饲料添加dsRNA筛选体系 | 第52页 |
5.4 同源克隆 | 第52页 |
5.5 筛选到的靶标基因 | 第52-53页 |
5.6 讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
英文摘要 | 第60-62页 |
附录 | 第63-71页 |