| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-21页 |
| 1.1 肝癌 | 第8-9页 |
| 1.1.1 癌症的概述 | 第8页 |
| 1.1.2 肝癌的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 胆汁淤积性肝病 | 第9-14页 |
| 1.2.1 胆汁淤积性疾病的概述 | 第9-10页 |
| 1.2.2 胆汁淤积性疾病的分类 | 第10-11页 |
| 1.2.3 胆汁淤积性肝病的诱因 | 第11页 |
| 1.2.4 胆汁淤积性肝病的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.3 胆汁酸对肝癌细胞的作用 | 第14-19页 |
| 1.3.1 胆汁酸的概述 | 第14-16页 |
| 1.3.2 胆汁酸对肝癌细胞的作用及作用机制 | 第16-18页 |
| 1.3.3 胆汁酸治疗肝癌应用 | 第18-19页 |
| 1.4 论文的选题依据及研究内容 | 第19-21页 |
| 2 细胞系的选择、培养和细胞活性的测定 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.1.1 细胞系的选择 | 第21页 |
| 2.1.2 药品与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 细胞的培养 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第25页 |
| 2.2.3 细胞冻存及解冻 | 第25-26页 |
| 2.3 细胞活性的测定 | 第26-29页 |
| 2.3.1 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.3.2 TCA短期干预 | 第27-28页 |
| 2.3.3 体外模拟胆汁淤积下TCA长期干预 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 3 细胞凋亡检测与细胞形态观察 | 第34-50页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.1 药品与试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第35页 |
| 3.2 实验测试方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 细胞凋亡检测方法 | 第35-39页 |
| 3.2.2 细胞形态观察测试方法 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-49页 |
| 3.3.1 TCA短期干预后细胞凋亡 | 第39-41页 |
| 3.3.2 体外模拟胆汁淤积性肝病下TCA长期干预后细胞凋亡 | 第41-43页 |
| 3.3.3 TCA短期干预后细胞形态观察 | 第43-46页 |
| 3.3.4 体外模拟胆汁淤积性肝病下TCA长期干预后细胞形态观察 | 第46-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 4 TCA诱导肝癌细胞凋亡的分子作用机制 | 第50-77页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第50-53页 |
| 4.1.1 药品与试剂 | 第50-51页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第51-52页 |
| 4.1.3 设计与合成的引物 | 第52-53页 |
| 4.2 实验测试方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 RNA的提取 | 第53-54页 |
| 4.2.2 cDNA的合成 | 第54-55页 |
| 4.2.3 RT-PCR反应 | 第55-56页 |
| 4.2.4 细胞内活性氧的测定 | 第56-57页 |
| 4.2.5 细胞内Ca~(2+)的测定 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-76页 |
| 4.3.1 TCA短期干预后相关基因表达 | 第58-64页 |
| 4.3.2 体外模拟胆汁淤积下TCA长期干预后相关基因表达 | 第64-70页 |
| 4.3.3 TCA短期干预后细胞内ROS | 第70-71页 |
| 4.3.4 体外模拟胆汁淤积下TCA长期干预后细胞内ROS | 第71-72页 |
| 4.3.5 TCA短期干预后细胞内Ca~(2+) | 第72-74页 |
| 4.3.6 体外模拟胆汁淤积下TCA长期干预后细胞内Ca~(2+) | 第74-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 创新点与展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
