| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1 乳酸菌作为益生菌的作用 | 第10页 |
| 2 S-层蛋白(SLP) | 第10-16页 |
| ·乳酸杆菌的SLP | 第11-15页 |
| ·乳酸杆菌SLP的特性 | 第11-13页 |
| ·乳酸杆菌SLP的基因 | 第13页 |
| ·乳酸杆菌SLP序列比对及二级结构分析 | 第13-14页 |
| ·SLP与细胞的吸附 | 第14-15页 |
| ·SLP的应用 | 第15-16页 |
| ·乳酸杆菌SLP的鉴定与提取 | 第16页 |
| 3 核酸分子杂交技术 | 第16-21页 |
| ·核酸探针的种类、标记及检测 | 第17-19页 |
| ·核酸探针的种类 | 第17-18页 |
| ·核酸探针的标记及检测 | 第18-19页 |
| ·核酸分子杂交技术的应用 | 第19-21页 |
| ·病原微生物检测 | 第19-20页 |
| ·核酸序列测序 | 第20页 |
| ·人类遗传学的诊断 | 第20-21页 |
| 4 本文的研究意义及内容 | 第21-22页 |
| ·研究意义 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 检测乳酸杆菌SLP基因的寡核苷酸探针的设计 | 第22-28页 |
| 1 设计思路与方法 | 第22-23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-26页 |
| ·从GenBank获得不同乳酸杆菌SLP的基因 | 第23页 |
| ·序列在NCBI的blast数据库中的比对 | 第23-26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 寡核苷酸探针特异性的鉴定 | 第28-34页 |
| 1 材料与方法 | 第28-32页 |
| ·材料与设备 | 第28-29页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·主要药品与试剂 | 第28-29页 |
| ·主要设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·菌株的培养 | 第29-30页 |
| ·培养基的制备 | 第29页 |
| ·菌株的培养 | 第29-30页 |
| ·菌落原位杂交 | 第30-31页 |
| ·主要试剂的制备 | 第30页 |
| ·菌落转移 | 第30-31页 |
| ·滤膜的处理 | 第31页 |
| ·杂交 | 第31页 |
| ·信号检测 | 第31-32页 |
| ·主要试剂的制备 | 第31页 |
| ·洗膜 | 第31-32页 |
| ·显色 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 含SLP基因乳酸杆菌的分离、筛选与鉴定 | 第34-48页 |
| 1 材料与方法 | 第34-41页 |
| ·试验材料 | 第34-36页 |
| ·样品及来源 | 第34-35页 |
| ·阳性菌株和阴性菌株 | 第35页 |
| ·主要药品与试剂 | 第35页 |
| ·主要设备 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·乳酸杆菌的筛选 | 第36-38页 |
| ·培养基与试剂的制备 | 第36页 |
| ·样品处理及增菌培养 | 第36-37页 |
| ·乳酸杆菌的初步筛选 | 第37页 |
| ·乳酸杆菌的纯化 | 第37页 |
| ·乳酸杆菌的活化 | 第37页 |
| ·乳酸杆菌的培养 | 第37-38页 |
| ·菌落原位杂交 | 第38页 |
| ·菌落转移 | 第38页 |
| ·滤膜的处理 | 第38页 |
| ·杂交 | 第38页 |
| ·信号检测 | 第38页 |
| ·洗膜 | 第38页 |
| ·显色 | 第38页 |
| ·乳酸杆菌SLP的提取 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE检测乳酸杆菌SLP | 第38-40页 |
| ·主要试剂的制备 | 第38-39页 |
| ·配置分离胶 | 第39页 |
| ·4%的浓缩胶的配制 | 第39页 |
| ·样品制备 | 第39-40页 |
| ·电泳 | 第40页 |
| ·16SrRNA鉴定乳酸杆菌 | 第40-41页 |
| ·主要试剂的制备 | 第40页 |
| ·细菌基因组DNA的提取(CTAB/NaCl法) | 第40页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR产物测序 | 第41页 |
| ·数据分析 | 第41页 |
| 2 结果与讨论 | 第41-46页 |
| ·乳酸杆菌的分离与纯化 | 第41-42页 |
| ·菌落原位杂交 | 第42-43页 |
| ·乳酸杆菌SLP的提取 | 第43-44页 |
| ·16SrRNA鉴定乳酸杆菌 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 本文主要结论 | 第48-49页 |
| 1 寡核苷酸探针制备方法的建立 | 第48页 |
| 2 对含SLP基因的乳酸杆菌的筛选 | 第48-49页 |
| 创新点与展望 | 第49-50页 |
| 1 创新点 | 第49页 |
| 2 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 附图 | 第61-63页 |